分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验采用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆获得草鱼乙酰辅酶A羧化酶β（ACC2）基因全长cDNA，并采用实时荧光定量PCR技术研究ACC2基因在肝胰脏、脾脏、大脑、前肠、中肠、后肠、肾脏、肌肉、心脏和肠系膜脂肪等组织中的表达，同时，还对饲喂不同脂肪源饲料12周后草鱼肝胰脏和肌肉中以及饥饿再次投喂后3、6、12和24 h肝胰脏中ACC2 mRNA的表达变化进行了研究。结果显示：草鱼ACC2基因cDNA全长7 533 bp，含1个7 149 bp的开放阅读框，编码2 382个氨基酸，ACC2蛋白计算分子质量为268.34 ku，等电点为6.13。草鱼ACC2基因存在可变剪接，形成另外1个同工型（isoforms），比分子质量为268.34 ku的ACC2蛋白少8个氨基酸。ACC2基因在所有检测组织中均有表达，ACC2 mRNA的相对表达量在肌肉中最高，为29.13，在肝胰脏中最低，仅为1.90。肌肉中ACC2 mRNA的相对表达量与大脑、前肠和心脏差异不显著（P>0.05），但显著高于其他组织（P0.05）；饥饿再投喂后草鱼肝胰脏中ACC2 mRNA相对表达量在12 h达到高峰值，为6.17，之后明显下降，24 h时仅为2.84。本试验成功克隆了草鱼ACC2基因全长cDNA，其主要的功能位点ATP结合位点、生物素结合位点与其他脊椎动物相比基本保守。草鱼ACC2基因主要在肌肉等脂肪分解活跃的组织中表达，投喂不同脂肪源饲料对草鱼肝胰脏中ACC2 mRNA的相对表达量无显著影响；饥饿再投喂后，肝胰脏中ACC2 mRNA的相对表达量在投喂12 h后最高。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验采用反转录PCR(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆获得草鱼乙酰辅酶A羧化酶β（ACC2）基因全长cDNA，并采用实时荧光定量PCR技术研究ACC2基因在肝胰脏、脾脏、大脑、前肠、中肠、后肠、肾脏、肌肉、心脏和肠系膜脂肪等组织中的表达，同时，还对饲喂不同脂肪源饲料12周后草鱼肝胰脏和肌肉中以及饥饿再次投喂后3、6、12和24 h肝胰脏中ACC2 mRNA的表达变化进行了研究。结果显示：草鱼ACC2基因cDNA全长7 533 bp，含1个7 149 bp的开放阅读框，编码2 382个氨基酸，ACC2蛋白计算分子质量为268.34 ku，等电点为6.13。草鱼ACC2基因存在可变剪接，形成另外1个同工型（isoforms），比分子质量为268.34 ku的ACC2蛋白少8个氨基酸。ACC2基因在所有检测组织中均有表达，ACC2 mRNA的相对表达量在肌肉中最高，为29.13，在肝胰脏中最低，仅为1.90。肌肉中ACC2 mRNA的相对表达量与大脑、前肠和心脏差异不显著（P>0.05），但显著高于其他组织（P0.05）；饥饿再投喂后草鱼肝胰脏中ACC2 mRNA相对表达量在12 h达到高峰值，为6.17，之后明显下降，24 h时仅为2.84。本试验成功克隆了草鱼ACC2基因全长cDNA，其主要的功能位点ATP结合位点、生物素结合位点与其他脊椎动物相比基本保守。草鱼ACC2基因主要在肌肉等脂肪分解活跃的组织中表达，投喂不同脂肪源饲料对草鱼肝胰脏中ACC2 mRNA的相对表达量无显著影响；饥饿再投喂后，肝胰脏中ACC2 mRNA的相对表达量在投喂12 h后最高。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验采用RT-PCR（反转录PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术从半滑舌鳎肝脏中克隆了乙酰辅酶A羧化酶α（ACC1）基因全长cDNA，并采用实时荧光定量PCR方法对半滑舌鳎ACC1基因在肠道、肝脏、肌肉、卵巢、脾脏、全脑、肾脏、心脏、肠系膜脂肪等组织中的表达进行了研究；此外，还研究了饲料脂肪水平对半滑舌鳎肝脏中ACC1基因表达的影响。结果表明：1)半滑舌鳎ACC1基因cDNA全长7 811 bp，含1个7 074 bp的开放阅读框，编码2 357个氨基酸，ACC1蛋白计算分子质量为266 ku，等电点为6.42。半滑舌鳎ACC1氨基酸序列保守位点包括1个ATP结合位点(Gly316～Gly321)、1个生物素结合位点(Val785-Met786-Lys787-Met788)、1个辅酶A结合位点(Ser1969～Val1995)。此外，半滑舌鳎ACC1基因存在可变剪接，形成另外2个同工型（isoforms），与分子质量为266 ku的ACC1相比，分别少8和15个氨基酸。半滑舌鳎ACC1氨基酸序列与其他脊椎动物的相似度很高，与斑马鱼和小鼠的相似度分别为93%和87%。2）半滑舌鳎所有组织中均检测到ACC1基因的表达，肝脏和全脑中ACC1 mRNA相对表达量显著高于其他组织（P0.05）。综上，本试验克隆出了半滑舌鳎ACC1基因的全长cDNA，并得出半滑舌鳎ACC1蛋白的主要功能位点为ATP结合位点、生物素结合位点、辅酶A结合位点，与其他脊椎动物相比基本保守。半滑舌鳎ACC1基因主要在肝脏和大脑等生脂组织中表达，饲料中添加鱼油显著抑制其肝脏中ACC1基因的表达，且抑制作用与鱼油添加量成正相关。
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