分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在探讨植物乳杆菌对大肠杆菌感染猪肠道上皮细胞（IPEC-J2细胞）形态、存活和免疫应答的影响。在体外条件下，采用吉姆萨和台盼蓝染色方法检测植物乳杆菌对大肠杆菌感染IPEC-J2细胞形态和存活的影响，并采用实时定量荧光PCR方法研究了其对大肠杆菌感染IPEC-J2细胞免疫应答的影响。结果表明：植物乳杆菌能够缓解大肠杆菌引起的IPEC-J2细胞形态损伤。与大肠杆菌处理组相比，植物乳杆菌与大肠杆菌共同处理可显著或极显著降低细胞死亡率（1、2 h，P<0.01；3 h，P<0.05）。植物乳杆菌可显著抑制大肠杆菌引起的IPEC-J2细胞Toll样模式识别受体2（TLR2）（2、3 h，P<0.01）、Toll样模式识别受体6（TLR6）（2 h，P<0.05；3 h，P<0.01）、NOD样模式识别受体2（NOD2）（1 h，P<0.05；2 h，P<0.01）及炎症因子白细胞介素-6（IL-6）（2、3 h，P<0.01）、白细胞介素-8（IL-8）（2、3 h，P<0.01）mRNA的过表达（P<0.05），还可促进IPEC-J2细胞NOD样模式识别受体1（NOD1）mRNA的表达（2 h，P<0.05；3 h，P<0.01）。结果提示，植物乳杆菌能够缓解大肠杆菌引起的IPEC-J2细胞形态损伤及死亡，并可通过调节模式识别受体TLR2、TLR6和NOD2 mRNA的表达缓解大肠杆菌引起的细胞炎症因子IL-6、IL-8 mRNA的过表达。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-20 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在对1只死亡野生川金丝猴的胃肠道菌群多样性及其克隆测序条带的系统进化树进行分析。取死亡野生川金丝猴胃肠道内容物，进行聚合酶链式反应（PCR）-变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析，结合条带的克隆测序、聚类分析和主成分（PCA）分析检测菌群多样性并构建系统进化树。结果显示：1）野生川金丝猴整个胃肠道栖息着大量细菌，且来自胃、小肠的样品聚为一大簇，来自大肠的样品聚为一簇，而来自粪便的样品单独聚为一簇。2）从DGGE图谱上共回收18个条带，细菌种类鉴定主要是5个菌门，分别为变形菌门（Proteobacteria，38.89%）、厚壁菌门（Firmicutes，22.22%）、拟杆菌门（Bacteroidetes，5.56%）、放线菌门（Actinobacteria，5.56%）、疣微菌门（Verrucomicrobia，5.56%）和不可培养菌（uncultured bacterium，22.22%）。其中，变形菌门和厚壁菌门分布于整个胃肠道。3）菌群的系统进化树分析表明，仅有1种不可培养菌与已鉴定的粪肠球菌进化分类相似，而其他不可培养菌与已知的菌种进化分支差异较大，说明在野生川金丝猴的胃肠道中仍有大量的菌群信息未被鉴定。结果提示，本试验测定的1只死亡野生川金丝猴的胃肠道优势菌群为变形菌门，菌群多样性随着胃肠道由前至后的顺序呈现高-低-高的趋势。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：研究STAT3在肝癌细胞SK-Hep1对sorafenib抗性中的作用，并探讨STAT3基因沉默在增强sorafenib肝癌疗效中的作用。 方法：应用基于shRNA的基因沉默技术在肝癌细胞SK-Hep1中敲减STAT3；用CCK8法检测细胞的生长情况与对sorafenib的敏感性；蛋白印迹法（Western blot）检测STAT3、p-STAT3（Y705）、p-STAT3（S727）以及其下游蛋白的表达变化。 结果：成功构建了STAT3敲减的细胞株SK-Hep1-shSTAT3。该细胞中STAT3蛋白表达降低，细胞增殖明显受到抑制。Sorafenib处理下调了STAT3磷酸化水平及其下游蛋白Mcl-1和CyclinD1的表达。STAT3基因敲减的SK-Hep1细胞中，sorafenib敏感性增强。 结论：基于shRNA的STAT3基因沉默能明显抑制SK-Hep1细胞增殖，提高细胞对sorafenib的敏感性，有望成为提高sorafenib抗肝癌疗效的一种新手段。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-11-07 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究小熊猫胃肠道菌群多样性。采用聚合酶链式反应（PCR）-变性梯度凝胶电泳（DGGE）技术结合条带的克隆测序、聚类分析和主成分分析（PCA）检测小熊猫胃肠道菌群结构及多样性。结果表明：1）PCR-DGGE图谱显示小熊猫胃肠道中有大量菌群，且不同部位的菌群结构存在一定的差异，相邻肠段菌群结构具有一定的相似性。结肠和粪便样品的菌群多样性较高，其次为胃和直肠样品，而空肠和回肠样品菌群多样性较低。2）小熊猫胃肠道菌群PCR-DGGE图谱中测序的条带大多数归为厚壁菌门（Firmicutes）、拟杆菌门（Bacteroides）、变形菌门（Proteobacteria）和疣微菌门（Verrucomicrobia），共性条带主要是未培养拟杆菌门细菌（uncultured Bacteroidetes bacterium）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis）、未培养梭状芽孢杆菌（uncultured Clostridium sp.）、乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）和食窦魏斯氏菌（Weissella cibaria），其中厚壁菌门为优势菌群；特异性条带主要是丛毛单胞菌（Comamonas sp.）、梭菌属（Clostridium sp.）和Akkermansia。由此可见，小熊猫胃肠道中栖息着大量菌群，且其多样性按照胃肠道由前至后的顺序呈现高-低-高的趋势。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究不同精粗比饲粮中添加甘露寡糖（MOS）对绵羊体外瘤胃发酵的影响。采用4×6二因子析因试验设计，在4种不同精粗比饲粮（20:80、30:70、40:60、50:50）中分别添加6个水平的MOS（0、0.4%、0.8%、1.2%、1.6%、2.0%），制备出24种底物，以体外产气法对各底物培养3、6、9、12和24 h，对体外培养液pH、氨态氮（NH3-N）浓度和挥发性脂肪酸（VFA）浓度进行测定。结果表明：精粗比对培养液pH、NH3-N浓度、总挥发性脂肪酸（TVFA）浓度和丁酸含量产生了显著影响（P<0.05），MOS水平对培养液NH3-N浓度产生了显著影响（P＜0.05），精粗比与MOS水平对培养液NH3-N浓度产生显著的交互作用（P<0.05）。随着精粗比的提高，培养液TVFA浓度和丁酸含量升高，而pH和NH3-N浓度降低；随着MOS水平升高，培养液NH3-N浓度略有升高。综合得出，不同精粗比饲粮中添加MOS对绵羊体外瘤胃发酵NH3-N浓度有显著影响，其中MOS的影响较轻微，尚未呈现剂量效应，主体起作用的仍是精粗比；饲粮精粗比的提高增加了绵羊体外瘤胃发酵VFA浓度，降低了pH和NH3-N浓度。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验采用尼龙袋法研究不同精粗比饲粮中添加甘露寡糖(MOS)对绵羊瘤胃养分降解率的影响。选取6只安装永久瘤胃瘘管的羯羊(白萨福克♂×小尾寒羊♀)，采用4×6双因子析因试验设计，共设饲粮精粗比和MOS添加水平2个因子，其中饲粮精粗比分别为20:80(A1)、30:70(A2)、40:60(A3)和50:50(A4)，MOS添加水平分别为0(B1)、0.4%(B2)、0.8%(B3)、1.2%(B4)、1.6%(B5)和2.0%(B6)。结果显示：饲粮精粗比对不同时间点绵羊瘤胃干物质(DM)、有机物(OM)和粗蛋白质(CP)的降解率、降解参数[DM、OM：快速降解部分(a)、慢速降解部分(b)和可降解部分(a+b);CP：a、b和b部分的降解速率(c)]及有效降解率均产生了显著影响(P0.05)。由此得出，饲粮精粗比为50:50时绵羊瘤胃干物质、有机物和粗蛋白质的有效降解率最高，MOS添加水平达到1.6%时绵羊瘤胃粗蛋白质的降解率最高。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究健康肉鸡回肠的微生物群落结构及功能。采用高通量测序技术对15只鸡的回肠内容物进行测序，按照97%的相似度归类OTUs，去除序列数量少的OTUs（n＜2），然后进行生物信息学分析及PICRUSt基因预测。结果表明：1）共获得424 062条tags，并归类于1 002个非单OTUs，样品平均tags为（28 271±8 855）条，平均OTUs为（261±82）个。2）所有样品共含有20个菌门，160个菌属。其中，共享核心菌门4个，分别是厚壁菌门（85.35%）、变形菌门（6.09%）、蓝细菌门（2.15%）和放线菌门（0.16%）。共享核心菌属19个，占样品总微生物总量的93.75%。3）鸡回肠预测得出328个功能。从前20功能热图可知，各样品的效能存在差异。由此可见，鸡回肠微生物群落复杂，但主要菌群相对稳定。本试验为进一步研究鸡回肠微生物群落结构与功能提供参考依据。
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