• 橡胶树形成层组织的酵母双杂cDNA 文库构建及HbHDA6互作蛋白筛选

    分类: 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间: 2023-12-24 合作期刊: 《广西植物》

    摘要: 乳管是天然橡胶合成和贮存的场所,是由维管形成层细胞分裂分化而来的。次生乳 管的数量与天然橡胶产量直接相关,而这些乳管的数量取决于形成层分化次生乳管的频率 (乳管分化能力),是橡胶树产量育种的主要指标。前期研究中,我们发现组蛋白去乙酰化 酶(HDA)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)能诱导橡胶树乳管分化,且组蛋白去乙酰化酶基因 (HbHDA6)能够参与橡胶树乳管分化调控。由于组蛋白乙酰化修饰调控橡胶树乳管分化的 分子机制尚未阐明,该文使用冠菌素(COR)诱导橡胶树形成层分化产生次生乳管的实验 系统,分离形成层组织为材料,构建酵母双杂交cDNA 文库,以HbHDA6 基因为诱饵来筛 选酵母双杂交文库,确定与HbHDA6 相互作用的蛋白。结果表明:(1)利用Gateway 技术 构建的均一化COR 诱导橡胶树形成层组织的酵母双杂交cDNA 文库,初级文库的容量为 6.3×106,总单克隆数为1.2×107,文库重组率为100%;次级文库的容量为7.7×106,总单克 隆数为1.5×107,文库重组率为100%。初级文库和次级文库的插入片段平均长度,分别为 1.1 kb 和1.2 kb。(2)成功构建了筛选HbHDA6 互作蛋白的pGBKT7-HbHDA6 诱饵载体, 并确认无自激活活性。(3)使用该诱饵载体对构建的酵母双杂交cDNA 文库进行筛选,并 通过NCBI_blast 比对和去除重复以后,获得了22 个与HbHDA6 发生互作的蛋白,包括CLP1, ERF3,ERF4,HSP82,LARP6a,APT5,PP2A,FBA6 等。该研究成果为解析组蛋白乙酰 化修饰调控橡胶树乳管分化的分子机制提供理论基础,为转基因改良橡胶树的产胶潜力提供 候选基因,为高性能天然橡胶遗传改良育种提供新线索。

  • 藏药多刺绿绒蒿种子萌发特性研究

    分类: 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间: 2019-02-25 合作期刊: 《广西植物》

    摘要: 多刺绿绒蒿(Meconopsis horridula )为罂粟科绿绒蒿属一年生草本植物,是一种极具观赏价值和药用价值的高山植物,目前处于濒危状态。研究多刺绿绒蒿种子的萌发特性对其种子育苗及人工栽培具有重要意义。该研究以多刺绿绒蒿的种子为材料,研究不同消毒剂、浸种时间、温度和外源植物激素对种子萌发特性的影响。结果表明:(1)最适消毒方法为 75%乙醇 1 min + 3% H2O2 5 min,最适浸种时间为 24 h,最适温度和光照条件为 20 ℃/10 ℃(光照 12 h/黑暗 12 h),用无菌水浸种后的种子发芽率为 49.67%。(2)GA3 100 ~ 600 mg·L-1 和 NAA 5 ~ 30 mg·L-1 可以提高种子的发芽率、发芽势和发芽指数,缩短发芽启动时间和发芽持续时间,对种子的萌发有促进作用。(3)6-BA 5 mg·L-1 和 10 mg·L-1 对种子的萌发有一定的促进作用,但不显著,6-BA 浓度≥15 mg·L-1 则抑制种子的萌发。(4)用 GA3 500 mg·L-1 浸种后的种子发芽指标最好,发芽率、发芽势和发芽指数分别为 69.67%、33.00%、4.51,种子的发芽起始时间和发芽持续时间分别为 10.67 d、11.67 d。