摘要: 为探索内生真菌与广藿香互作间对宿主活性成分形成机制的影响,以成分差异较大的
牌香和湛香为研究对象,采用传统形态学方法对所获菌株归类,通过真菌通用引物
ITS1/ITS4 扩增菌株 rDNA-ITS 序列,鉴定其分类地位并研究其多样性。结果表明:(1)用
PDA 和 LBA 培养基对苗期、分枝期和成株期广藿香茎叶组织块进行内生真菌分离,共获得3
070 株菌株,其中,牌香分离出 1 624 株,鉴定出 1 319 株,分属于 36 属;湛香分离出 1 446
株,鉴定出 994 株,分属于 33 属。牌香分离出 7 种特有内生真菌,分别为香柱菌(Epichloe
typhina)、盘长孢状刺盘孢菌(Colletotrichum gloeosporioides)、座腔孢菌(Botryosphaeria sp.)、
丝核菌(Rhizoctonia sp.) 及 截盘多毛 孢菌(Truncatella sp.) , 并首次分 离到疫霉菌
(Phytophthora sp.)和指疫霉菌(Sclerophthora sp.),这 2 种菌属于卵菌门内生菌。湛香
分离出拟青霉菌(Paecilomyces sp.)和尾孢菌(Cercospora sp.)2 种特有内生真菌。(2)牌香和
湛香优势内生真菌相同,均为链格孢菌(Alternaria sp.)和刺盘孢菌(Colletotrichum sp.),
其中,牌香中相对分离频率为 9.48%和 7.81%,湛香为 10.16%和 8.65%。(3)随着从苗期到
成株期,牌香和湛香内生真菌定殖率逐渐增高,依次为牌香 8 月(97.78%)>7 月(72.50%)>5月
(55.28%);湛香 8 月(91.11%)>7 月(63.06%)>5 月(46.67%)。平均定殖率为牌香
75.19%,湛香 66.95%。(4)随着生长期延长,牌香和湛香内生真菌多样性呈递增的趋势,
同时,2 种广藿香内生真菌平均相似性系数为 0.86。可见,牌香和湛香内生真菌种类丰富,
各有独特的内生真菌,且不同生长期内生真菌种群组成不同。以上研究结果为筛选活性内生真
菌菌株,探究内生真菌影响广藿香活性成分合成与积累奠定了基础。