靶向B细胞并特异结合其分泌IL-10的重组融合蛋白的构建、表达和初步鉴定

摘要: 目的：CD19单链抗体可变区（single-chain fragment variable）scFv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子，白细胞介素-10（interleukin-10，IL-10）是调节性B细胞（Breg）的主要特征之一。这篇文章旨在构建CD19scFv和IL-10受体1（IL-10R1）胞外段的重组融合蛋白，拟用该融合蛋白捕捉和封闭Breg细胞分泌的IL-10。方法：CD19scFv和IL-10R1胞外段克隆到pET-28a原核质粒上，E. coli BL21（DE3）工程菌表达蛋白通过镍柱富集和纯化蛋白，SDS-PAGE和Western Blot对表达蛋白进行鉴定，pull down实验验证蛋白与CD19分子和IL-10细胞因子的结合。结果：成功表达CD19scFv-IL-10R1融合蛋白,该融合蛋白能在体外同时结合CD19和IL-10分子。结论：CD19scFv-IL-10R1融合蛋白在体外可以同时结合CD19分子和IL-10分子，具有潜在应用前景可作为特异性抑制Breg的生物小分子。