亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞内乳脂合成相关基因和蛋白表达的影响

摘要: 本试验旨在研究亮氨酸（Leu）对泌乳奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂合成相关基因和蛋白表达的影响，以探讨Leu对乳脂合成的影响机理。将第3代BMECs随机分为6个处理，每个处理6个重复。6个处理培养液中Leu浓度分别为0.45、0.90、1.80、2.70、3.60和7.20 mmol/L ，37 ℃、5% CO2培养48 h后测定BMECs内甘油三酯（TG）的含量及乳脂合成相关基因和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）与固醇调节元件结合蛋白（SREBP1）蛋白的的相对表达量。结果显示：Leu浓度对BMECs内TG含量无显著影响（P>0.05）。适宜浓度的Leu显著促进脂肪酸合成酶（FASN）和乙酰辅酶A羧化酶A（ACACA）基因的表达(P<0.05)，FASN基因的相对表达量以1.80~2.70 mmol/L Leu处理、ACACA基因的相对表达量以1.80~7.20 mmol/L处理较高。Leu浓度显著影响BMECs内SREBP1基因及蛋白表达（P<0.05），以1.80 mmol/L Leu的促进效果最好。虽然Leu显著抑制BMECs内脂肪酸结合蛋白3（FABP3）、脂蛋白脂酶（LPL）、乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6(AGPAT6)、线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶（GPAM）和嗜乳脂蛋白亚家族1成员1（BTN1A1）基因的表达（P<0.05），但只有高浓度（3.60~7.20 mmol/L）的Leu抑制作用较大。综合来看，Leu浓度影响BMECs乳脂合成相关基因及PPARγ和SREBP1蛋白的表达。Leu浓度为1.80~2.70 mmol/L时，对脂肪酸从头合成相关基因及调控因子SREBP1蛋白表达的促进效果较好，对TG合成及脂滴形成相关基因表达的抑制作用较小。