基因组重排筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株

作者： 宋佳雯 ¹ 田苏 ¹ 张玉如 ¹ 王志珍 ¹ 常忠义 ¹ 高红亮 ¹ 步国建 ¹ 金明飞 ¹
作者单位：

1. 华东师范大学生命科学学院

2. 华东师范大学

3. 泰兴市东圣食品科技有限公司

4. 华东师范大学生命科学学院

5. 华东师范大学生命科学学院

6. 华东师范大学生命科学学院

7. 泰兴市东圣食品科技有限公司

8. 华东师范大学生命科学学院
提交时间：2017-07-24 09:25:42

摘要: 谷氨酰胺转胺酶（TGase）的产量不足的问题一直限制其工业化生产规模，故采用基因组重排的方法，筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株。通过对不同制备条件下原生质体纯度和形成率的考量，获得制备原生质体的最优条件为以6mg/mL的溶菌酶浓度进行酶解，酶解时间2h。再优化融合条件，以2min紫外灭活和40min热灭活结合的方法挑选出融合子。通过两轮基因组重排，经过96孔板发酵高通量筛选和摇瓶发酵复筛验证，获得了一株产酶达7.12U/mL的茂源链霉菌，相比最初选用菌株的平均酶活提高65.5%。发酵结果显示，酶活提高的原因可能是在重组后原酶成熟更快更彻底，且得到的菌株遗传稳定性良好。证明基因组重排能够有效提高菌株的产酶水平，同时为谷氨酰胺转胺酶产量提高提供理论依据。

微生物谷氨酰胺转氨酶基因组重排茂源链霉菌高通量筛选

分类： 生物学 >> 生物工程
引用： ChinaXiv:201707.00684 (或此版本 ChinaXiv:201707.00684V1)
DOI:10.12074/201707.00684V1
CSTR:32003.36.ChinaXiv.201707.00684.V1
推荐引用方式： 宋佳雯,田苏,张玉如,王志珍,常忠义,高红亮,步国建,金明飞.(2017).基因组重排筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株.中国生物工程杂志.[ChinaXiv:201707.00684] (点此复制)

版本历史

[V1]

2017-07-24 09:25:42

ChinaXiv:201707.00684V1

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