分类： 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间： 2023-07-13 合作期刊: 《广西植物》
摘要： 为探究小黄花茶内生真菌种类和种群分布规律以及对植物病原真菌的抑制作用，该研 究采用组织分离法对小黄花茶内生真菌进行分离纯化，基于形态学和分子生物学进行鉴定， 结合统计学分析评价其多样性，再通过平板对峙法筛选出具有抑菌活性的菌株。结果表明： （1）从小黄花茶 324 份组织块中分离得到内生真菌 261 株，隶属于 1 门 5 纲 9 目 22 属，其 中优势属包括炭疽菌属（Colletotrichum）、间座壳属（Diaporthe）、拟盘多毛孢属 （Pestalotiopsis），分离频率分别为 21.84%、16.86%、10.34%。（2）研究发现小黄花茶内 生真菌在不同季节分布不同，冬季分离出的菌株数量最多，为 72 株，占 27.59%，分属于16 个属；春季 62 株，分属于 13 个属；夏季 59 株，分属于 15 个属；秋季 68 株，分属于 13个 属；冬季的香农-维纳指数（H′）、辛普森指数（D）、均匀度指数（E）和丰富度指数（M）最 高，春季与冬季内生真菌种类相似性较高，夏季与秋季内生真菌种类相似性较高。（3）小 黄花茶内生真菌不同部位分布不同，茎中内生真菌的分布最多，有 102 株，占 39.08%，分 属于 15 个属；根 61 株，分属于 10 个属；叶 98 株，分属于 15 个属；茎的香农-维纳指数、 辛普森指数、均匀度指数、丰富度指数最高，叶部与茎部内生真菌种类最为相似。（4）平 板对峙结果显示，在35 株供试内生真菌中，有26 株内生真菌至少对1 种植物病原真菌有抑 制作用，占74.29%，其中CJ-II-2、XY-V-3、QY-II-4、QJ-III-2、DJ-I-2 对8 种植物病原真菌 均有不同程度的抑制作用，XY-V-3 对8 种植物病原真菌的抑制效果最佳，抑菌率均高于50%， XY-V-3 和QJ-III-2 对2 株小黄花茶病原真菌的抑菌率高于50%，具备防治小黄花茶自身病 害的潜力。小黄花茶内生真菌多样性丰富，部分菌株表现出较好地抑制植物病原真菌的作用， 为生物防治产品的研发和小黄花茶病害的防治奠定了基础。
分类： 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间： 2021-11-04 合作期刊: 《广西植物》
摘要： 民族药刺梨根茎在贵州少数民族地区有着广泛的应用，为验证该民族药化学成分的抗炎功活性。该文以民族药新鲜刺梨根茎为原料，采用硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱等方法对其根茎的化学成分进行分离纯化，通过理化性质和NMR等波谱数据鉴定化合物的结构；采用脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7作为炎症模型，考察刺梨根茎化学成分对巨噬细胞经LPS刺激后产生的NO炎症因子的影响，评价其抗炎活性。结果表明：(1)从刺梨根茎乙醇提取物中共分离获得15个化合物，结构分别鉴定为刺梨苷(1)、野蔷薇苷(2)、蔷薇酸(3)、β-D-glucopyranosyl-(2a→1b)-2a-O-β-L-arabinopyranosyl-(2b→1c)-2b-O-β-L- arabinopyranosyl-(2c→1d)-2c-O-β-L-arabinopyranosyl-(2d→1e)-2d-O-β-L-arabinopyranosyl-(2e→1f)-2e-O-β-L-arabinopyranoside(4)、儿茶素(5)、3-O-methylellagic acid-4´-O-β-D- xylopyranoside(6)、3-O-methylellagic acid-4´-O-α-L-rhamnopyranoside(7)、委陵菜酸(8)、桦木酸(9)、spinosic acid(10)、arjunic acid(11)、β-谷甾醇(12)、β-胡萝卜苷(13)、α-tocopherol(14)、正二十六烷(15)。其中化合物4、6、7首次从该植物中分离得到。(2)对其中的化合物1-7进行体外抗炎活性实验，结果发现化合物1-7对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7释放的NO均有明显抑制作用，且呈剂量依赖关系；化合物1-7在抗炎作用上表现出较好活性，其IC50分别为25.07、24.56、17.65、9.80、16.67、40.83、34.98 μmol·L-1 (阳性对照地塞米松22.46μmol·L-1 )，其中化合物3、4、5的活性优于地塞米松。实验结果阐明了刺梨根茎中的三萜类、鞣花酸类、黄酮类和寡糖类化合物是其抗炎作用的主要有效成分和验证了刺梨根茎的民间抗炎功效。
分类： 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间： 2021-08-09 合作期刊: 《广西植物》
摘要： 为了深入发掘日本厚朴、厚朴、凹叶厚朴叶绿体基因组差异,筛选厚朴优良性状候选基因，开展三种厚朴的分子遗传研究，该文利用 Illumina HiSeq 高通量测序平台首次对日本厚朴叶绿体进行测序、组装，并与已有的厚朴、凹叶厚朴叶绿体基因组共同注释，获得三个物种叶绿体基因图谱，筛选出三个基因组中的差异基因，又与同科中 11 个亲缘物种进行叶绿体基因组比对，构建 NJ 遗传树。结果表明：日本厚朴叶绿体基因组的 Clean Reads 为 19 791 019，Q30 为 91.33%，组装后基因组全长 160 051 bp，GC 含量为 39.2%，含 tRNA 37 个，rRNA 8 个。比对分析发现三种厚朴具有相似的 IR、LSC 和 SSC 结构，以及 GC 含量和 tRNA 数量，但编码基因种类和数量、内含子和外显子的数量和结构等存在差异。日本厚朴的功能基因数目较厚朴、凹叶厚朴分别多 6 个和 4 个，主要分布于 LSC 区和 IR 区，涉及核糖体大亚基、核糖体小亚基和未知功能基因类群。系统发育分析结果进一步显示日本厚朴与凹叶厚朴亲缘关系较近，其次是厚朴。该研究表明日本厚朴具有更丰富的叶绿体基因组结构、组成和变异特征，是其适应高纬度地区弱光、低温环境的分子机制，这为厚朴类优良品种的分子选育提供有力的指导。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-25 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪血清生化指标和肠道营养物质转运载体mRNA表达的影响。选取144头初始体重为（6.49±0.01） kg的21日龄杜×长×大断奶仔猪，随机分为3组，每组8个重复，每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮，抗生素组饲喂基础饲粮+100 mg/kg喹乙醇+75 mg/kg金霉素，罗伊氏乳杆菌组饲喂基础饲粮+5×1010 CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1。试验期为14 d。结果显示：1）与对照组相比，饲粮添加抗生素显著提高了血清葡萄糖（GLU）的含量（P<0.05），且显著降低了血清尿素氮（UN）的含量（P<0.05）。2）与对照组相比，饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠胃动素（MLN）和空肠胆囊收缩素（CCK）的mRNA表达量（P<0.05）；饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠MLN的mRNA表达量（P<0.05）。3）与对照组相比，饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠Na+依赖性谷氨酰胺载体2（ASCT2）、阳离子氨基酸运载体1（CAT1）、小肽转运体1（PepT1）和空肠中性和碱性氨基酸转运载体（rBAT）以及空肠与回肠y+L氨基酸转运体1（y+LAT1）的mRNA表达量（P<0.05）；饲粮添加抗生素显著提高了空肠y+LAT1、CAT1、PepT1和空肠与回肠哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的mRNA表达量（P<0.05）。4）与对照组相比，饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了十二指肠小肠脂肪酸结合蛋白（I-FABP）、乙酰辅酶A羧化酶α（ACCα）、脂肪酸合成酶（FASN）和十二指肠与空肠脂肪酸结合蛋白3（FABP3）以及十二指肠、空肠与回肠过氧化物体增殖物激活受体γ（PPARγ）的mRNA表达量（P<0.05）；饲粮添加抗生素显著提高了空肠ACCα的mRNA表达量（P<0.05）。5）与对照组相比，饲粮添加罗伊氏乳杆菌LR1显著提高了空肠和回肠钠-葡萄糖协同转运蛋白1（SGLT1）的mRNA表达量（P<0.05）；饲粮添加抗生素显著提高了十二指肠SGLT1、钠-葡萄糖协同转运蛋白3（SGLT3）的mRNA表达量（P<0.05）。综上所述，饲粮中添加5×1010 CFU/kg罗伊氏乳杆菌LR1对断奶仔猪的肠道营养物质转运具有良好的促进作用，表现为促进断奶仔猪肠道物理消化和化学消化，促进小肽、氨基酸及脂肪酸吸收转运，增强脂肪酸的合成。罗伊氏乳杆菌LR1在替代猪饲用抗生素方面具有巨大潜力，可用于开发新型猪饲料抗生素替代物。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究饲粮添加丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、肠道结构和免疫功能的影响。选取（25±1）日龄、体重（6.24±0.32） kg的健康“杜×长×大”杂交仔猪360头，随机分为5个组，每组4个重复，每个重复18头猪。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别饲喂在基础饲粮中添加250、500、1 000和2 000 mg/kg丁酸梭菌的试验饲粮。试验期30 d。结果表明：1）250和1 000 mg/kg丁酸梭菌添加组断奶仔猪的平均日采食量(ADFI)显著低于对照组（P0.05）。结果提示，25～55日龄断奶仔猪饲粮添加250～500 mg/kg丁酸梭菌可改善断奶仔猪肠道结构，增强机体免疫功能。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在探讨利用近红外反射光谱技术测定棉籽粕常规营养成分含量和蛋公鸡代谢能的可行性。从全国范围内收集76个不同产地、不同年份、不同加工方式的棉籽粕样品，测定其常规营养成分含量，并通过蛋公鸡强饲试验测定其表观代谢能和真代谢能。随机选取定标集（n=56）和外部验证集（n=20）样品，建立近红外定标模型。结果表明：1）不同来源棉籽粕的营养成分和蛋公鸡代谢能变异较大，变异系数为2.52%~84.75%，其中水分、粗脂肪、粗纤维、表观代谢能和真代谢能的变异系数超过10%；粗蛋白质、粗灰分和总能的变异系数分别为9.58%、9.81%和2.52%。2）水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分和总能的定标决定系数为0.923 5~0.975 8，交互验证决定系数为0.824 7~0.930 3，外部验证决定系数为0.879~0.896；表观代谢能和真代谢能的定标决定系数为0.969 0和0.926 8，交互验证决定系数为0.917 0和0.905 7，外部验证决定系数为0.911和0.892。因此，常规营养成分和代谢能的定标方程均可用于日常分析。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-09-20
摘要： 维生素K2（VK2）是一系列具有异戊二烯侧链的甲萘醌类化合物，根据侧链长短不同，以MK-n表示。高活性VK2主要由微生物合成，具有防治骨质疏松症、出血症、肝硬化及帕金森症等疾病的生理功能。黄杆菌是其重要生产菌株，可合成包括MK4，MK5和MK6多种VK2同系物。 我们发现通过调控发酵温度，可以控制黄杆菌合成VK2的同系物类型和产量。在20~37℃范围内，25℃时Flavobacterium sp. M1-14生长最好，生物量达到8.8 g/L，但发酵产物完全是MK6，产量为13.9 mg/L，单位菌体产量1.6 mg/g。当发酵温度高于30℃，黄杆菌可同时合成MK4、MK5和MK6。37℃时，MK4和MK5产量最高，分别为1.6mg/L和1.7mg/L，VK2总量12.5 mg/L，但此时生物量仅5.5g/L，单位菌体产量为2.3mg/g。针对黄杆菌菌体生长和VK2同系物合成的最适温度差异，考虑采用变温发酵提高生物量和VK2产量。经多因素优化后，我们开发出先低温后高温的两段式变温策略，即25℃先发酵48小时，之后转为37℃继续发酵96小时，VK2产量达到20.9 mg/L（其中MK4为2.1 mg/L，MK5为2.3 mg/L、MK6为16.5mg/L），生物量为8.8g/L，单位菌体产量2.4mg/g。 继而，在30L发酵罐上，我们通过控制通气量和转速，考察了不同温度发酵对氧需求情况。发现在25℃和37℃时，黄杆菌发酵合成VK2的最佳kLa分别为360 h-1和60 h-1。针对变温发酵过程中菌体对氧需求的变化，我们开发了两阶段变kLa控制策略。优化后在变温发酵前期24小时kLa为360 h-1，之后120小时kLa 为60 h-1，VK2产量达到28.7 mg/L，（其中MK4为2.8mg/L，MK5为3.4 mg/L、MK6为22.5 mg/L），较起始提高了107%，生物量为15.5 g/L，单位菌体产量1.9 mg/g。 通过变温变kLa分阶段发酵调控策略，可以改变黄杆菌合成VK2的同系物类型，明显提高VK2产量，为实现VK2生物制备的工业化奠定了优化的基础。
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