分类： 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间： 2021-04-29 合作期刊: 《广西植物》
摘要： 土壤盐渍化严重影响小麦生产，提高小麦耐盐性是应对土壤盐渍化的主要生物途径之一。 小麦芽期亦是对盐分较为敏感的时期，小麦芽期耐盐性的强弱对对盐碱地小麦种植至关重要。为探 讨利用叶片生理指标进行小麦芽期耐盐性评价的可行性，该文以沧麦 6005 及其 73 个叠氮化钠诱变 家系为试验材料，在超纯水和 40%人工海水条件下，对芽期叶片中脯氨酸、可溶性糖、总蛋白和可 溶性蛋白的含量，以及过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性 等进行测定，利用主成分分析和聚类分析进行小麦芽期耐盐性综合评价。结果表明：（1）在 40% 人工海水盐胁迫下，小麦芽期叶片中脯氨酸和可溶性糖含量增加，总蛋白和可溶性蛋白含量降低。 过氧化物酶（POD）活性增强，而过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性减弱。（2） 主成分分析中第 1 和第 4 主成分是小麦芽期叶片耐盐的酶活响应因子，第 2 和第 3 主成分是小麦芽 期叶片耐盐的渗透调节因子。（3）在耐盐性评价中，沧麦 6005 芽期耐盐性鉴定等级为 2 级（耐盐）， 耐盐等级鉴定为 1 级（高耐）的家系为 SAM1、SAM49 和 SAM59，这与田间生产实践经验一致。 综上认为，过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）的活性，以及脯 氨酸和可溶性糖含量可以作为叶片生理指标进行小麦芽期耐盐性评价。本研究结果可为利用叶片生 理指标进行小麦芽期耐盐性评价提供参考。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-09-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 在原核生物中，钠/氢逆向转运蛋白具有催化细胞内的Na+、Li+或K+等碱基阳离子的排出，换取外部质子，以降低有毒碱性金属阳离子的细胞质浓度和维持细胞内pH稳态起到了至关重要的作用。为了进一步挖掘中度嗜盐菌Halobacillus Y5中具有盐碱耐受性的钠/氢逆向转运蛋白基因并对其功能进行鉴定，我们首先提取该菌的基因组DNA，然后采用Sau3AI随机酶切及功能互补的方法获得了一个新型的钠/氢逆向转运蛋白基因Ha_ydjM。生物信息学分析表明，该基因属于YdjM超家族成员，是一个未知功能的膜蛋白，系统发育分析证实，其与来自Halobacillus sp. Marseille –P 3789的YdjM（蛋白登录号WP_101846656.1）家族成员聚在一起但形成独立分支。研究发现，该基因能够恢复大肠杆菌突变株KNabc对0.2 M NaCl和5 mm LiCl 的耐受特性，并且耐受碱性pH 8.0。功能分析显示，该蛋白呈现pH依赖的钠/氢逆向转运蛋白活性，转运动力学分析表明，Na+、K+、Li+在KNabc中Km值分别是0.43 ± 0.05 mM、0.49 ± 0.06 mM、0.64 ± 0.06 mM，即对Na+、K+、Li+的亲和力分别是Na+ > K+ > Li+。综上所述，我们认为Ha_ydjM代表了一种新型的钠/氢逆向转运蛋白。该项研究丰富了YdjM超家族成员，并为其他未知膜蛋白功能分析提供依据。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-04-19 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 鸡卵清蛋白（Ovalbumin，OV）基因5’调控序列是构建鸡输卵管生物反应器的首选调控元件。以EGFP为报告基因，构建OV启动子真核表达载体，转染原代输卵管上皮细胞和CHO细胞，筛选得到1.1kb的高效OV启动子。构建1.1kb OV启动子表达H5N1亚型禽流感病毒HA蛋白真核表达载体pOV1.1k-HA，转染CHO细胞。PCR、RT-PCR鉴定结果证明HA基因整合至CHO细胞基因组，并进行转录；SDS-PAGE、Western blot及HA试验结果证明HA蛋白在CHO细胞内的表达，并具有免疫反应性和血凝活性。以纯化的HA蛋白免疫4周龄SPF鸡，2周后加强免疫一次，加强免疫3周HI抗体水平为6.3log2；以106 EID50 H5N1(A/Goose/Guangdong/1/96)亚型禽流感病毒鼻腔接种SPF鸡，免疫组100%存活，无排毒现象，对照组100%死亡。结果表明：筛选的1.1kb OV启动子可有效驱动HA蛋白表达，表达的HA蛋白免疫SPF鸡对禽流感病毒攻击提供完全保护；为鸡输卵管生物反应器表达保护性抗原和珍贵药物蛋白奠定了基础。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-02-11 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：制备负载NGF的可注射壳聚糖透明质酸复合水凝胶，探讨其理化性能以及生物相容性。方法：首先京尼平交联制备壳聚糖透明质酸复合水凝胶材料，采用倒置法检测凝胶时间；扫描电镜观察材料形态结构；NGF释放实验、体外溶胀以及降解实验等检测凝胶材料的物理化学性能；通过MTT实验、NGF活性检测、材料与细胞共培养检测凝胶材料生物学性能。结果：在37℃条件下，可注射凝胶材料凝胶时间在37min左右，凝胶材料为多孔网络状结构，凝胶材料8周最多能够降解76％，缓释21天的NGF具有生物活性，凝胶材料能促进RSC96细胞的粘附、增殖、迁移以及细胞活性物质的释放。结论：京尼平交联的壳聚糖透明质酸水凝胶具有良好的生物相容性，能作为NGF的载体材料，具有成为神经导管内填充材料的潜能。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 神经系统疾病是发生于中枢、周围、自主神经系统的以感觉、运动、意识、自主神经功能障碍为主要表现的疾病，是目前对人类危害最大的疾病之一。随着干细胞生物学的发展，人类在诱导干细胞神经分化方面取得了显著进展，并可能会解决神经修复与再生的关键问题。其中，小分子化合物因其在使用的便捷性、可控性和功能多样性等方面的显着优势，正越来越多地被用于干预和研究干细胞的增殖，分化和重编程等生物学行为。本文针对小分子化合物诱导干细胞神经分化的研究现状作一概述。
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