• B1对断奶仔猪生长性能、肝脏组织及肠道健康的影响

    分类: 生物学 >> 动物学 提交时间: 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》

    摘要: 本试验旨在考察黄曲霉毒素B1(AFB1)对断奶仔猪生长性能、肝脏组织和肠道健康的影响。试验选用32头胎次相近、21日龄的“杜长大”断奶仔猪,根据体重相近原则随机分为2组(每组16个重复,每个重复1头猪),分别饲喂基础饲粮(对照组)和含有0.3 mg/kg AFB1的饲粮(AFB1组)。试验期间自由采食和饮水,常规饲养管理,试验预试期3 d,正试期21 d。试验结束时所有猪进行空腹称重后每组选取与平均体重相近的6头猪采集样品,考察生长性能、肝脏健康、肠道黏膜形态和肠道微生物数量等指标。结果表明:与对照组相比,饲粮AFB1显著降低断奶仔猪平均日增重(P0.05);饲粮AFB1显著增加十二指肠绒毛高度和隐窝深度以及空肠隐窝深度(P0.05)。由此可见,饲喂含0.3 mg/kg AFB1的饲粮会导致断奶仔猪生长性能下降,肝脏组织和肠道健康轻微受损。

  • 基于噬菌体展示技术抗B1单链抗体的筛选及其蛋白结构分析

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2018-10-09 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)是一种毒性强、污染广的真菌毒素,建立高效、准确、快速的AFB1检测方法具有重要意义。利用噬菌粒-辅助噬菌体展示系统构建单链抗体(single chain variable fragment,scFv)文库,应用“淘选-洗脱”的策略,是筛选高亲和配体的常用方法之一。同时结合同源建模和分子对接等计算机辅助手段,分析得到抗体与抗原的结合位点与关键氨基酸,为在基因水平改造抗体提供基础。本研究从AFB1-BSA免疫小鼠的脾细胞内扩增重链可变区和轻链可变区,将组合成的scFv片段插入噬菌粒pCANTAB5e中,构建了噬菌体展示单链抗体文库,以不同浓度的AFB1-OVA作为抗原,从文库中筛选到一株亲和力较好的抗AFB1单链抗体scFv,其亲和常数为8×105 L/mol;根据同源建模和分子对接发现,与抗原AFB1结合时,scFv中Tyr33、Ser52和Tyr102起关键作用,分别以π-π共轭键、氢键和范德华力与AFB1结合。

  • B1胶体金快速定量检测试剂盒的研发

    分类: 生物学 >> 动物学 提交时间: 2017-11-08 合作期刊: 《动物营养学报》

    摘要: 本研究旨在应用胶体金免疫层析技术,结合胶体金定量读数仪研制出一种快速定量检测谷物和饲料中黄曲霉毒素B1含量的胶体金快速定量检测试剂盒。该试剂盒以胶体金标记高特异性单抗,与偶联抗原进行正交试验,确定适宜条件,同时通过与对照线和试验线的颜色对比,应用胶体金定量读数仪,对样本中黄曲霉毒素B1含量进行定量检测。结果表明,黄曲霉毒素B1胶体金快速定量检测试剂盒检测方法简便、快速、稳定性好,且可得出具体数据,避免了人肉眼观察的差异;与常见霉菌毒素无交叉反应,样品检测结果与高效液相色谱法检测结果的相对误差在20%以内。由此可见,本试验研制的黄曲霉毒素B1胶体金快速定量检测试剂盒可用于谷物和饲料中黄曲霉毒素B1含量的快速定量检测。

  • 蒙脱石对采食霉变花生粕型饲粮肉仔鸡生长性能和免疫机能的影响

    分类: 生物学 >> 动物学 提交时间: 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》

    摘要: 本试验旨在研究蒙脱石对采食天然黄曲霉素毒素B1(AFB1)污染花生粕饲粮的肉仔鸡生长性能和免疫机能的影响,确定蒙脱石作为霉菌吸附剂的饲用效果。选用288只1日龄爱拔益加(AA)健康公雏,随机分为4组,每组6个重复,每个重复12只鸡。正对照组饲喂玉米–豆粕型基础饲粮,负对照组饲粮用自然霉变花生粕(含AFB1 1 284.21 μg/kg;前期、后期饲粮分别添加8.8%和12.0%)替代部分豆粕,试验组分别在负对照组饲粮中添加2.0 g/kg的天然或改性蒙脱石。试验期42 d。结果表明:1)与正对照组相比,霉变花生粕显著降低了肉仔鸡平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、42日龄胸肌率和腿肌率以及血浆蛋白含量(P<0.05),显著提高了料重比和免疫器官指数(P<0.05)。2)与负对照组相比,天然或改性蒙脱石均显著提高了肉仔鸡ADG、ADFI及血浆蛋白含量(P<0.05),显著降低了免疫器官指数(P<0.05)。3)与天然蒙脱石组相比,改性蒙脱石显著提高了肉仔鸡ADG及血浆总蛋白和白蛋白含量(P<0.05),显著降低了胸腺指数(P<0.05)。综上,AFB1污染的霉变花生粕能降低肉仔鸡的生长性能和免疫功能,蒙脱石能缓解AFB1引起的不良影响,改性蒙脱石作用效果更佳。

  • 体外培养中硒对B1损伤凡纳滨对虾肝胰腺细胞的影响

    分类: 生物学 >> 动物学 提交时间: 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》

    摘要: 本试验旨在研究体外培养中硒(Se)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺细胞抗氧化能力的影响以及对黄曲霉毒素B1(AFB1)毒性的缓解作用。在体外培养肝胰腺细胞的基础上,设定含不同浓度(0、0.15、0.30、0.45、0.60、0.75 μg/mL)Se的培养液,研究Se对肝胰腺细胞抗氧化能力的影响;另用浓度为1 600 μg/L的AFB1侵染细胞,探究Se对AFB1毒性的缓解作用。结果表明:当Se浓度处于0~0.45 μg/mL时,随着Se浓度的增加,丙二醛(MDA)含量呈现降低趋势,但各个浓度之间并没有显著差异(P>0.05),过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力随着Se浓度的增加而增强,Se浓度为0.45 μg/mL时GSH-Px活力显著要高于其他浓度(除0.30 μg/mL)时(P<0.05);当Se浓度处于0.45~0.75 μg/mL时,随着MDA含量升高的同时CAT、GSH-Px活力下降。当细胞受到浓度为1 600 μg/L的AFB1侵染后,随着培养时间的增加,MDA含量表现一直升高的趋势,同时CAT、GSH-Px活力都有一定程度的下降;当细胞受到浓度为1 600 μg/L的AFB1和浓度为0.45 μg/mL的Se共同作用后,随着培养时间的增加,MDA含量有一定程度的改善,CAT、GSH-Px活力得到一定程度的恢复。由此可见,在体外培养条件下,浓度为0.45 μg/mL的Se有利于提高凡纳滨对虾肝胰腺细胞的抗氧化能力,且在一定程度上能缓解AFB1对肝胰腺细胞的毒性作用。