地高辛标记Ucp2 基因RNA探针的制备和应用

作者： 刘志贞 ^{山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原 030001} 张凯丽 ^{山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原 030001} 孙雨晴 ^{山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原 030001} 赵虹 ^{山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原 030001} 郝宇卉 ^{忻州职业技术学院医学系基础医学教研室忻州 034000} 李美宁 ^{山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原 030001}
作者单位：

1. 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室, 太原 030001

2. 忻州职业技术学院医学系基础医学教研室, 忻州 034000
提交时间：2018-07-11 10:53:54

摘要: 目的：为了制备用于检测小鼠胚胎早期Ucp2基因表达的地高辛标记的特异性RNA探针。方法：提取小鼠胚胎脑组织总RNA，设计引物，通过RT -PCR方法获取Ucp2基因片段，将其克隆到pGEM -T载体。分别利用Sp6、T7和Ucp2特异性引物，PCR扩增获得转录模板，通过Sp6及T7 RNA聚合酶，获得地高辛标记的正义、反义Ucp2 RNA原位杂交探针。检测标记探针的效价后，通过全胚胎原位杂交分析制备探针的特异性和杂交效果。结果：成功获得Ucp2基因正义、反义探针，反义探针能高效灵敏检测到Ucp2基因在小鼠胚胎Ed9.5、Ed10.5神经系统呈现高表达，而正义探针未能检测到表达信号。结论：成功制备了特异高效的地高辛标记Ucp2 RNA 原位杂交探针，为进一步研究Ucp2基因在小鼠胚胎组织中的表达，尤其在神经组织的定位奠定基础。

Ucp2 RNA探针全胚胎原位杂交

分类： 生物学 >> 生物工程
引用： ChinaXiv:201807.00039 (或此版本 ChinaXiv:201807.00039V1)
DOI:10.12074/201807.00039V1
CSTR:32003.36.ChinaXiv.201807.00039.V1
推荐引用方式： 刘志贞,张凯丽,孙雨晴,赵虹,郝宇卉,李美宁.(2018).地高辛标记Ucp2 基因RNA探针的制备和应用.中国生物工程杂志.[ChinaXiv:201807.00039] (点此复制)

版本历史

[V1]

2018-07-11 10:53:54

ChinaXiv:201807.00039V1

下载全文

相关论文推荐

1. 甲基苯丙胺成瘾患者的尿液蛋白质组学研究	2024-05-25
2. 健康人连续一个月摄入营养素补充剂后尿液蛋白质组的变化	2024-05-25
3. 澳洲坚果果仁MiMYB44L 基因克隆与结构功能分析	2024-05-15
4. 海南省分布的国家重点保护野生植物组成及区系特征	2024-05-15
5. 水分和土壤微生物对干热河谷山合欢和银合欢生长性状的影响	2024-05-15
6. 湖北省国家重点保护野生植物分布与研究进展	2024-05-15
7. 氮素形态对穿心莲氮吸收、分配和内酯成分积累的影响	2024-05-15
8. 六盘山区幼龄辽东栎根系共生真菌的分离和鉴定	2024-05-15
9. 水母雪兔子通气组织形成相关基因SmPAD4 的克隆及表达分析	2024-05-15
10. 西藏煨桑植物的民族植物学调查研究	2024-05-15


公开评论匿名评论仅发给作者