定点突变提高醇脱氢酶LkTADH催化制备他汀关键手性砌块的酶活

作者： 陈方 ¹ 徐刚 ¹ 杨立荣 ¹ 吴坚平 ¹
作者单位：

1. 浙江大学化学工程与生物工程学院生物工程研究所,浙江杭州 310027
提交时间：2018-05-16 09:31:14

摘要: (S)-6-氯-3-羰基-5-羟基己酸叔丁酯（(S)-CHOH）是他汀类药物合成的关键手性中间体。利用醇脱氢酶催化6-氯-3,5-二羰基己酸叔丁酯不对称合成(S)-CHOH是很有潜力的制备路线，目前存在的主要问题是醇脱氢酶催化活性较低。首先对来源于Lactobacillus kefir DSM 20587的醇脱氢酶的四点突变体LkTADH（A94T/F147L/A202L/L199H）进行回复突变，确定了关键位点147和202位，并获得比酶活提高1倍的突变体M F147L-A202L。对这两个位点进行饱和突变，获得比酶活比LkTADH提高1.47倍的突变体M F147I-A202L。其比酶活为10.17U/mg，为目前文献报道最高水平。通过动力学分析和分子对接，分析了突变位点对酶活影响的机理，为后续研究奠定了良好的基础。

醇脱氢酶 (S)-6-氯-3-羰基-5-羟基己酸叔丁酯不对称合成分子改造饱和突变

分类： 生物学 >> 生物工程
引用： ChinaXiv:201805.00143 (或此版本 ChinaXiv:201805.00143V1)
DOI:10.12074/201805.00143V1
CSTR:32003.36.ChinaXiv.201805.00143.V1
推荐引用方式： 陈方,徐刚,杨立荣,吴坚平.(2018).定点突变提高醇脱氢酶LkTADH催化制备他汀关键手性砌块的酶活.中国生物工程杂志.[ChinaXiv:201805.00143] (点此复制)

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2018-05-16 09:31:14

ChinaXiv:201805.00143V1

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