分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 对人源类溶菌酶蛋白6(human lysozyme-like protein 6,LYZL6)在受精过程中的作用进行研究,并对重组LYZL6蛋白(recombinant LYZL6,rLYZL6)的生理特性进行分析,从而揭示其生理功能。细胞免疫荧光法确定LYZL6定位于成熟精子头部的顶体后区域,反转录PCR(RT-PCR)分析表明精子表面的LYZL6蛋白来源于睾丸和附睾的分泌,Western blot法分析表明精子获能前后表面LYZL6的量无明显改变。半透明带结合实验和精子穿透实验分析表明兔抗LYZL6血清未明显抑制人精子结合透明带,但可明显抑制精卵融合。利用毕赤酵母表达系统成功表达了rLYZL6,使用甲壳素亲和层析和凝胶过滤层析可从发酵上清中纯化到具有生物活性的rLYZL6。酶联免疫吸附法(ELISA)分析显示rLYZL6不具有透明质酸结合能力、透明质酸水解能力和自由基清除活性,但具有较强的肽聚糖结合能力和异肽酶活性。LYZL6由睾丸和附睾分泌后定位于成熟精子头部的顶体后区域,可以参与精卵融合,并具有肽聚糖结合能力和异肽酶活性,提示LYZL6可能通过多种机制参与精子
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 猪链球菌是一种传染性革兰氏阳性细菌,是严重影响养猪业发展的重要人畜共患病原体,造成人类死亡率在5%到20%之间。其毒力因子在致病过程中发挥着重要作用。近年来对猪链球菌2型的毒力因子研究有诸多新的进展,对其致病机理的了解和对该病有效防控都有新的认识。本文对近些年研究2型猪链球菌毒力相关因子,在蛋白类、酶类研究新进展,同时对毒力因子基因表达双组份系统、与宿主免疫系统相互作用的IV型分泌系统的进展进行总结和分析,以期为猪链球菌病的治疗和疫苗的研制提供新参考。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 目的:研究白花地胆草(Elephantopus mollis H.B.K)的乙醇提取物EM-12抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT检测EM-12对卵巢癌细胞活性影响;克隆形成抑制实验检测EM-12对卵巢癌细胞增殖能力的影响; GSEA(Gene set enrichment analysis)分析EM-12对卵巢癌2774-C10细胞的影响; PI单染检测细胞周期; Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡; Western blotting检测细胞凋亡、周期相关蛋白。结果:MTT实验结果表明,EM-12可以显著抑制卵巢癌细胞的活性;RNA-seq及GSEA分析表明EM-12诱导2774-C10发生G1/S期阻滞;克隆形成抑制实验结果表明,EM-12可以显著抑制卵巢癌细胞的增殖;流式细胞术结果表明随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐增加,并且G1期细胞比例逐渐增加,S期细胞比例减少,发生G1/S期阻滞。Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加cyclin E2、Cyclin D1、CDK2、CDK6蛋白水平下降 ,并伴随caspase-8、Caspase-3活化及多聚ADP核糖聚合酶PARP酶切失活。 结论:EM-12诱导卵巢癌细胞发生G1/S期阻滞,且通过死亡受体通路诱导细胞凋亡。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 酸脱氢酶具有重要的意义。为了获得理想的R-扁桃酸脱氢酶,本研究采用基因组挖矿技术从Lactobacillus harbinensis菌株中获得了一个新型的R-扁桃酸脱氢酶LhDMDH,重组LhDMDH的比酶活高达1264.3 U/mg,约为探针的4倍,在已报道的R-扁桃酸脱氢酶中处于领先水平。同时,考察了4个重组酶主要的酶学特性,它们的最适反应温度在25~30℃,最适反应pH在9.0~9.5。动力学参数的结果表明,LhDMDH对底物的Kcat值为30.28 S-1,明显高于其它重组酶。此外,底物谱分析的结果也表明LhDMDH在外消旋扁桃酸的手性拆分及苯乙酮酸的生物合成中更具优势。本研究在R-扁桃酸脱氢酶基因挖掘方面取得了较为理想的结果,为进一步的改造及应用奠定了坚实的基础,也为其它酶的挖掘提供了可资借鉴的经验。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-22 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 研究探索自组装短肽R2I4R2在人皮肤成纤维细胞体外三维培养的应用效果与对创伤修复过程的作用。通过圆二色谱仪分析不同理化条件对其二级结构的影响;刚果红染色宏观检测短肽自组装情况;体外培养人皮肤成纤维细胞探索细胞在R2I4R2形成的纳米纤维网络中的生长状态及凋亡情况;建立SD大鼠皮肤创伤模型,HE染色与免疫组织化学检测其对皮肤创伤修复的病理变化。结果表明,R2I4R2在不同条件下均可形成较为稳定的二级结构;自组装24h后可形成均一稳定的膜片状装结构,为细胞三维培养提供支架;人皮肤成纤维细胞可在R2I4R2形成的纳米纤维网络三维环境中生长且状态良好;动物实验表明,短肽R2I4R2可减少炎症、促进新生血管生成、加速皮肤创伤修复过程。自组装短肽R2I4R2作为新的纳米支架材料,可用于细胞三维培养与皮肤创伤修复。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-20 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: “一带一路”贯穿亚欧非大陆,联结活跃的东亚经济圈和发达的欧洲经济圈,以及中间经济发展潜力巨大的广大腹地国家与地区,“一带一路”战略将对中国未来国内外的政治、经济、文化、科技发展产生重大深远影响。本报告分析了“一带一路”沿线国家的科技发展基础条件,研究了“一带一路”沿线国家在生物技术领域取得的基础研究进展和专利技术研发进展的总体情况,综述了“一带一路”沿线国家生物技术产业发展现状和国际专利布局情况,并针对中国与“一带一路”沿线国家在生物技术领域进一步深化合作互利共赢提出了发展建议。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 目的:CD19单链抗体可变区(single-chain fragment variable)scFv能特异性识别结合B细胞表面的CD19分子,白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)是调节性B细胞(Breg)的主要特征之一。这篇文章旨在构建CD19scFv和IL-10受体1(IL-10R1)胞外段的重组融合蛋白,拟用该融合蛋白捕捉和封闭Breg细胞分泌的IL-10。方法:CD19scFv和IL-10R1胞外段克隆到pET-28a原核质粒上,E. coli BL21(DE3)工程菌表达蛋白通过镍柱富集和纯化蛋白,SDS-PAGE和Western Blot对表达蛋白进行鉴定,pull down实验验证蛋白与CD19分子和IL-10细胞因子的结合。结果:成功表达CD19scFv-IL-10R1融合蛋白,该融合蛋白能在体外同时结合CD19和IL-10分子。结论:CD19scFv-IL-10R1融合蛋白在体外可以同时结合CD19分子和IL-10分子,具有潜在应用前景可作为特异性抑制Breg的生物小分子。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 神经系统疾病是发生于中枢、周围、自主神经系统的以感觉、运动、意识、自主神经功能障碍为主要表现的疾病,是目前对人类危害最大的疾病之一。随着干细胞生物学的发展,人类在诱导干细胞神经分化方面取得了显著进展,并可能会解决神经修复与再生的关键问题。其中,小分子化合物因其在使用的便捷性、可控性和功能多样性等方面的显着优势,正越来越多地被用于干预和研究干细胞的增殖,分化和重编程等生物学行为。本文针对小分子化合物诱导干细胞神经分化的研究现状作一概述。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 在医学上,神经系统对神经损伤的自我修复能力往往有限。[摘要第一句话已根据修改意见删除]因此,探索有效修复损伤神经的方法已经成为近年来研究热点。研究发现脂肪干细胞对各类损伤神经都有一定的修复作用,可作为修复神经损伤的种子细胞。脂肪干细胞不仅具有干细胞的特性而且还具有自身的优点,首先它属于成体细胞,来源于中胚层,具有多种分化的潜能,其次免疫原性较低,易于取材,另外脂肪干细胞移植后的风险较低,因此被认为是修复神经损伤的优秀种子细胞。本文就脂肪干细胞的特性以及脂肪干细胞在神经创伤修复方面的研究进展和存在的问题进行综述。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 环状 RNA是一类新发现以共价键形成环状结构的RNA分子,没有5'帽和3'尾,具有高度的序列保守性和稳定性,不易被核酸外切酶降解,在转录或转录后水平发挥基因表达调控的作用。近年来,环状RNA已被发现与许多肿瘤包括胃癌发生密切相关。本文首先介绍环状 RNA形成、分类、分子特征和功能,然后从环状 RNA与胃癌发生、环状 RNA与胃癌诊断、以及环状 RNA在胃癌治疗中的作用等3个方面阐述环状RNA与胃癌的关系。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 在免疫分析和生物芯片中,抗原-抗体特异性结合被广泛应用,其中抗体的固定化是研发高效诊断和分离工具的关键环节.生物分子工程、材料化学与交联剂化学的进步极大地促进了抗体固定化技术的发展. 抗体可以通过物理吸附、共价偶联和亲和相互作用固定到不同类型的固相表面. 抗体固定化的目标是以一种正确的空间取向将抗体固定到固相表面,在完全保留抗体构象和活性的同时最大化抗原的结合能力,这对固相化抗体的分析性能至关重要. 本文对固定抗体到固相载体表面的各种最新方法进行了阐述,包括物理吸附法,通过羧基、氨基、巯基、糖基和点击化学的共价结合法以及基于生物亲和作用的固定法,并对固定化抗体的表征方法进行了归纳,最后对抗体固定化方法的发展方向进行了展望.
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 环磷酸腺苷(3’,5’-cyclic adenosine monophosphate,缩写为cAMP)是普遍存在于生物机体内并起着十分重要作用的生理活性物质,被称为第二信使。cAMP于1957年被首次发现报道,随后因为其在生命活动中的特殊地位和作用而被大量研究,外源性cAMP早在上世纪七十年代就被开发成人类临床药物,在动物生产领域也有极大的潜在应用价值。目前已知临床用cAMP原料药全部由化学法合成。而微生物发酵法生产菌种则以节杆菌、枯草芽孢杆菌和酵母为代表;运用代谢调控机理和技术,用节杆菌发酵生产cAMP产量报道已达≥7.23 g/L,用枯草芽孢杆菌也已达到6~7 g/L,而酵母作为典型的模式生物,虽然cAMP-PKA信号转导途径基础研究历史悠久,但发酵生产cAMP则近几年才有报道。进一步改造菌株、优化发酵技术提高产量和解决分离提纯问题外,充分发挥微生物发酵法的潜力和优势、弥补化学法合成的不足,是赢得其产业化契机的关键。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 玉米细胞核雄性不育突变体是研究花粉发育和减数分裂的理想材料,也是杂种优势利用的重要种质资源。随着分子生物技术的快速发展,部分玉米细胞核雄性不育基因陆续被成功克隆,为其在工程不育化杂交种生产中的应用奠定了基础。本文综述了近年来对玉米细胞核雄性不育的细胞学鉴定、基因克隆和分子机理的研究进展,并对其应用途径和前景进行了分析
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 雄性不育技术在玉米杂种优势利用和杂交种生产中发挥着重要作用,玉米花药发育和雄性不育的细胞生物学与分子遗传学研究是雄性不育技术利用的前提和基础。玉米花药发育是一个复杂的生物学过程,需要孢子体基因与配子体基因的协同表达调控。本文从玉米花药的形态结构、花药发育时期的划分、花药败育类型、花药发育的细胞学研究方法、花药发育的组学研究方法、花药发育分子遗传学研究方法等方面进行综述,以期为玉米核不育机理研究与雄性不育技术产业化应用提供方法学指导。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-12-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 雄性不育技术在作物杂种优势利用和杂交种生产中发挥着重要作用。基于核质互作雄性不育的“三系法”与光温敏核不育的“两系法”已经在水稻等主要作物的杂交制种中获得了广泛应用,但是存在着资源利用效率低、育性不稳定、易受外界环境影响等诸多问题。近三十年来,利用生物技术创建不同类型的植物雄性不育系取得了一系列突破性进展。本文主要针对玉米、水稻、小麦三大作物的基因工程雄性不育技术的最新进展进行总结,特别详细地描述了本实验室最近研究创制的玉米多控不育技术体系,以期为相关研究和产业化应用提供技术参考。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-11-28 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 2,3-丁二醇应用广泛,是一种潜在的平台化合物,可以用于替代传统平台化合物-四碳烃。基于能源安全及绿色环保的需求,生物炼制制备2,3-丁二醇受到人们的青睐。与化学法相比,生物炼制制备2,3-丁二醇具有明显的优势。因此,开发合适的2,3-丁二醇发酵工艺是实验室研究的重点。针对菌种Klebsiella pneumoniae CICC10011,研究人员对菌种发酵产2,3-丁二醇的性质进行了初步考察,并通过控制不同的发酵条件,研究了pH、通空气量和转速在发酵过程中对菌种代谢的影响,从而确定了菌种发酵产2,3-丁二醇的工艺条件。发酵过程中,pH、通空气量以及转速均采用两段调控。在前12h菌种生长阶段,控制pH 6.8,通空气量1.0vvm,转速400rpm,转发酵之后控制发酵条件为pH 6.0,通空气量0.5vvm,转速300rpm。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-11-27 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 粘红酵母是重要的产油微生物之一,有的种属油脂含量可以达到其干重的70%。其胞内代谢物中包含大量可加工生产生物柴油的相关物质,如游离脂肪酸、甘油三酯等。本文主要以超声破碎法(即空化作用)提取粘红酵母胞内代谢物,利用气相质谱联用方法检测各物质,通过归一化法计算各物质含量,并对所得数据进行处理与分析,寻找最合适提取胞内代谢物的方法,针对不同种类胞内代谢物找出相应的实验条件和提取方法。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-11-26 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 赖氨酰内肽酶是一种重要的工具酶,广泛应用于科学研究及工业化生产。目前市场上的赖氨酰内肽酶大多是从天然微生物中提取获得,其高昂的价格限制了其广泛运用,重组表达能够解决产量的难题。本文首次对赖氨酰内肽酶进行了综述,包括赖氨酰内肽酶的来源、结构、功能性质、及其主要应用,并重点总结了近年来的重组表达进展,同时对今后的研究方向进行了展望。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-11-26 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 利用高产早籼嘉育253和高产抗稻瘟病早籼品种中组3号为亲本,通过系谱法和产量比较试验,最终选育获得早籼稻新品种中早39。对超级早籼稻品种中早39及其系谱亲本嘉育253和中组3号进行产量相关性状、光合特性、叶面积指数和光合色素含量等测定和比较分析,发现中早39的每穗总粒数和结实率优于其系谱亲本,库容优势明显;中早39在齐穗后保持最高的净光合速率,其叶面积指数和各光合色素含量也一直优于系谱亲本,因此,中早39具有超高产光合生理特性。育种初期选用了高产亲本,且中早39比其系谱亲本具有更优的光合生理特性,说明水稻高产育种中优良性状的整合;中早39超高产优势来自于品种选育过程中源库的优化、株叶形态的改善;本研究为水稻高产育种提供了参考信息。
分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2017-11-26 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要: 赖氨酰内肽酶是一种重要的工具酶,广泛应用于科学研究及工业化生产。目前市场上的赖氨酰内肽酶大多是从天然微生物中提取获得,其高昂的价格限制了其广泛运用,重组表达能够解决产量的难题。本文首次对赖氨酰内肽酶进行了综述,包括赖氨酰内肽酶的来源、结构、功能性质、及其主要应用,并重点总结了近年来的重组表达进展,同时对今后的研究方向进行了展望。