乌金猪与约大乌猪不同组织间防御素基因mRNA的表达规律及东亚飞蝗抗菌活性物质对其在免疫应激细胞中表达的调节作用

分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》

李美荃 刘红 张春勇 安清聪 骆雪 陈克嶙 郭荣富

摘要： 本试验旨在检测乌金猪和具有乌金猪血缘的约大乌猪不同组织间β防御素-1（pBD-1）、β防御素-2（pBD-2）和β防御素-3（pBD-3）基因mRNA表达的差异，并探讨东亚飞蝗抗菌活性物质（LAAS）对猪胎儿皮肤成纤维细胞（PFSF）免疫应激参数和防御素（pBDs）基因mRNA表达的调节作用。采用实时荧光定量PCR方法检测2月龄乌金猪与约大乌猪心脏、肝脏、肺脏、肾脏、空肠、回肠、十二指肠、皮肤、肌肉、胰腺、睾丸或卵巢这12种组织中pBD-1、pBD-2和pBD-3基因mRNA的表达差异；采用培养至第4~5代的PFSF，通过脂多糖（LPS）诱导建立免疫应激模型，在DMEM/F12培养液中添加不同浓度（0、75、150、300、600和1 200 μg/mL）的LAAS，考察LAAS对PFSF免疫应激参数和pBD-1、pBD-2、pBD-3基因mRNA表达的影响。结果表明：1）乌金猪血清溶菌酶（LSZ）活性、免疫球蛋白G（IgG）含量显著高于约大乌猪（P<0.05），血清一氧化氮（NO）含量极显著低于约大乌猪（P<0.01）。2）约大乌猪大多数组织中pBD-1、pBD-2和pBD-3基因mRNA的表达量高于乌金猪；2个品种猪的pBD-1和pBD-3基因mRNA均在皮肤和卵巢中表达量较高，pBD-2基因mRNA在肝脏和肾脏中表达量较高。3）300 μg/mL LAAS极显著降低了培养液中乳酸脱氢酶（LDH）活性（P<0.01)；LAAS极显著增加了培养液中NO含量（除75 μg/mL组正常细胞外）（P<0.01），正常细胞和应激细胞均在LAAS浓度为600 μg/mL时达到最高；LAAS浓度为0、75和150 μg/mL时应激细胞一氧化氮合酶（NOS）活性显著或极显著高于正常细胞（P<0.05或P<0.01）；添加1 200 μg/mL LAAS可极显著降低培养液中的LSZ活性（P<0.01），LAAS浓度为150、300、600和1 200 μg/mL时应激细胞与正常细胞中LSZ活性差异显著或极显著（P<0.05或P<0.01）。4）应激细胞pBD-1、pBD-2和pBD-3基因mRNA的表达量均高于正常细胞；当LAAS浓度为150 μg/mL时，pBD-1、pBD-2和pBD-3基因mRNA的表达量最高。结果提示，乌金猪和约大乌猪防御素基因的表达存在明显的品种差异性和组织特异性，适宜浓度的LAAS能够降低PFSF中LDH活性，提高NO含量及NOS、LSZ活性，上调应激细胞与正常细胞防御素的表达量。

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