同源过表达BglR对嗜热毁丝霉β-葡萄糖苷酶活性的影响

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

来亚鹏 邓婷婷 刘刚 王娟

摘要： 目的：克隆嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila ATCC42464)bglr基因，构建Mtbglr 过表达载体，研究同源过表达bglr对嗜热毁丝霉β-葡萄糖苷酶活性及总纤维素酶活性的影响。方法：利用SLIC技术构建Mtbglr 过表达载体；使用MtPpdc启动子及MtTpdc终止子将该基因进行同源过表达；利用原生质体转化、实时荧光定量PCR和酶活测定等技术实现bglr基因在嗜热毁丝霉中表达及酶活水平的鉴定。结果：成功构建Mtbglr过表达载体，并转化嗜热毁丝霉，结果表明诱导培养条件下，转化子Mt8菌株的β-葡萄糖苷酶活性和胞外蛋白浓度分别是WT菌株的1.7和1.9倍。结论：bglr基因对嗜热毁丝霉β-葡萄糖苷酶活性具有增强作用，为嗜热真菌β-葡萄糖苷酶基因调控奠定了理论基础。

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