Subjects: Biology >> Zoology submitted time 2017-10-11 Cooperative journals: 《动物营养学报》
Abstract：本试验通过建立过氧化氢(H2O2)诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡模型，研究谷氨酰胺（Gln）、甘氨酰谷氨酰胺（Gly-Gln）和丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）对凋亡细胞的凋亡率及Bcl-2、Bax基因表达量的影响。选用60日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞，采用不同浓度[0(对照组)、100、400、800 µmol/L]的H2O2培养细胞，应用流式细胞术检测细胞凋亡情况。传代瘤胃上皮细胞分为5组，对照组和1组分别添加0、800 µmol/L H2O2，2组、3组、4组均添加800 µmol/L H2O2，同时分别添加17.28 mmol/L Gly-Gln（2组）、16.0 mmol/L Gln（3组）、16.0 mmol/L Ala-Gln（4组），应用流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测细胞Bcl-2、Bax基因表达量。结果显示：1）与对照组相比，当H2O2浓度增加到800 µmol/L时，早期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），而晚期凋亡的凋亡率随着H2O2浓度的增加呈现增加后减少的趋势，但相对于对照组，都呈显著增加（P＜0.05）。2）与对照组相比，4组晚期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），试验组早期凋亡的凋亡率均显著增加（P＜0.05）。3）与对照组相比，试验组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05）；与1组相比，2组、3组和4组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05），且2组显著高于3组、4组（P＜0.05）。综合得出，Gly-Gln对H2O2引起山羊瘤胃上皮细胞早期凋亡具有一定的保护作用。
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Abstract：本试验通过建立过氧化氢(H2O2)诱导山羊瘤胃上皮传代细胞凋亡模型，研究谷氨酰胺（Gln）、甘氨酰谷氨酰胺（Gly-Gln）和丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）对凋亡细胞的凋亡率及Bcl-2、Bax基因表达量的影响。选用60日龄湘东黑山羊的瘤胃上皮传代细胞，采用不同浓度[0(对照组)、100、400、800 µmol/L]的H2O2培养细胞，应用流式细胞术检测细胞凋亡情况。传代瘤胃上皮细胞分为5组，对照组和1组分别添加0、800 µmol/L H2O2，2组、3组、4组均添加800 µmol/L H2O2，同时分别添加17.28 mmol/L Gly-Gln（2组）、16.0 mmol/L Gln（3组）、16.0 mmol/L Ala-Gln（4组），应用流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时采用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测细胞Bcl-2、Bax基因表达量。结果显示：1）与对照组相比，当H2O2浓度增加到800 µmol/L时，早期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），而晚期凋亡的凋亡率随着H2O2浓度的增加呈现增加后减少的趋势，但相对于对照组，都呈显著增加（P＜0.05）。2）与对照组相比，4组晚期凋亡的凋亡率显著增加（P＜0.05），试验组早期凋亡的凋亡率均显著增加（P＜0.05）。3）与对照组相比，试验组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05）；与1组相比，2组、3组和4组Bcl-2/Bax均显著增加（P＜0.05），且2组显著高于3组、4组（P＜0.05）。综合得出，Gly-Gln对H2O2引起山羊瘤胃上皮细胞早期凋亡具有一定的保护作用。
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Abstract：本试验用青稞秸秆替代燕麦干草作为唯一粗饲料来源，研究其对生长期藏绵羊体增重及免疫功能的影响。选择18只4~5月龄健康河谷型藏绵羊，随机分为2组，即：青稞组（青稞秸秆300 g/d+精料300 g/d）和燕麦组（燕麦干草300 g/d+精料300 g/d）。试验期4周，第1周为预试期，第2～4周为正试期。正试期结束后，按公母各占1/2原则，各组分别选取6只羊屠宰采样。结果发现：青稞组与燕麦组藏绵羊的体重、日增重、脾脏重和脾脏指数均差异不显著（P>0.05）；青稞组与燕麦组藏绵羊血清中免疫球蛋白（Ig）G、IgA、IgM溶菌酶含量和酸性磷酸酶活性均差异不显著（P>0.05），但青稞组中溶菌酶含量有高于燕麦组的趋势（P=0.083）；青稞组与燕麦组血清、胸腺和脾脏白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6、IL-10和干扰素γ(IFN-γ)含量均差异不显著（P>0.05）。综合来看，与燕麦干草相比，饲喂青稞秸秆不会降低生长期藏绵羊的体增重及免疫性能，且有提高机体非特异性免疫因子（溶菌酶）含量的潜力，可作为藏绵羊的粗饲料来源。
Subjects: Biology >> Zoology submitted time 2017-10-10 Cooperative journals: 《动物营养学报》
Abstract：本研究旨在建立浏阳黑山羊瘤胃上皮细胞的体外培养模型，并对其周期分布、增殖和凋亡特点进行研究。试验采集60日龄浏阳黑山羊的瘤胃上皮组织，应用0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸（EDTA）消化法对山羊瘤胃上皮组织进行消化，得到单个的山羊瘤胃上皮原代细胞进行体外培养。通过倒置显微镜对原代和传代培养阶段细胞形态进行观察，采用细胞计数法检测细胞的生长活性，应用细胞免疫组化学方法对传代细胞进行鉴定，并用流式细胞术检测山羊瘤胃上皮传代细胞周期分布情况和凋亡比率。结果显示：1）经0.25%胰蛋白酶+0.02% EDTA消化获得的山羊瘤胃上皮原代细胞，培养1 d开始贴壁生长，2 d开始生长较快（对数期），呈典型的“波峰”状生长，3～4 d生长最为迅速，7 d生长速度平稳（平台期）。2）经免疫细胞化学方法的鉴定，细胞胞浆为黄褐色，即细胞角蛋白19呈阳性表达。3）膜联蛋白-V/碘化丙啶联合染色显示，随着培养时间的延长，细胞凋亡比率显著增加（P＜0.01）。结果表明，通过0.25%胰蛋白酶+0.02% EDTA的消化方法成功得到了山羊瘤胃上皮细胞，可为今后研究反刍动物瘤胃相关机制与功能提供模型。
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