分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 古紫质4(Archaerhodopsin 4, aR4)是新近发现的古生菌Halobacterium species xz515红膜上唯一的光敏视黄醛蛋白，具有和细菌视紫红质(Bacteriorhodopsin, bR)相似的质子泵功能，但在中性pH条件下，其质子释放和摄取顺序与bR相反。针对质子供体天冬氨酸97(Aspartic acid 97, D97)对aR4光循环、特别是对质子释放摄取顺序和菌株ATP生成率的影响，采用基因定点突变技术，构建了aR4的单突变体D97N，以及相对应的bR单突变体D96N。采用紫外-可见吸收光谱和闪光动力学光谱技术初步研究突变对视黄醛键合区、光反应中间态M态和O态、质子泵功能以及菌株ATP生成率的影响。结果表明，D97N突变对视黄醛紫外-可见光吸收波长没有太大影响，但造成M态衰减时间的显著延长、质子泵功能的消失以及菌株ATP的生成率大幅降低。与bR中的D96作用相比，D97对aR4质子功能的影响有所不同，这可能与D97所处的一个更为疏水性的胞外侧环境有关。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 谷氨酰胺转胺酶（TGase）的产量不足的问题一直限制其工业化生产规模，故采用基因组重排的方法，筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株。通过对不同制备条件下原生质体纯度和形成率的考量，获得制备原生质体的最优条件为以6mg/mL的溶菌酶浓度进行酶解，酶解时间2h。再优化融合条件，以2min紫外灭活和40min热灭活结合的方法挑选出融合子。通过两轮基因组重排，经过96孔板发酵高通量筛选和摇瓶发酵复筛验证，获得了一株产酶达7.12U/mL的茂源链霉菌，相比最初选用菌株的平均酶活提高65.5%。发酵结果显示，酶活提高的原因可能是在重组后原酶成熟更快更彻底，且得到的菌株遗传稳定性良好。证明基因组重排能够有效提高菌株的产酶水平，同时为谷氨酰胺转胺酶产量提高提供理论依据。
分类： 生物学 >> 植物学 >> 植物生态学和植物地理学 提交时间： 2016-05-03
摘要： 利用2011–2012年野外标准地实测资料, 结合第八次全国森林资源清查资料, 研究了浙江省森林生态系统碳储量及其分布特征。结果表明: 浙江省森林生态系统碳储量为602.73 Tg, 其中乔木层、灌草层、枯落物层和土壤层碳储量分别为122.88 Tg、16.73 Tg、11.36 Tg和451.76 Tg, 分别占生态系统碳储量的20.39%、2.78%、1.88%和74.95%; 在各森林类型中, 阔叶混交林碳储量为138.03 Tg, 所占比例最大(22.91%)；在森林各龄组中, 幼、中龄林约占浙江省森林生态系统碳储量的70.66%, 是碳储量的主要贡献者。浙江省森林生态系统平均碳密度为120.80 t·hm–2, 乔木层、灌草层、枯落物层和土壤层碳密度分别为24.65 t·hm–2、3.36 t·hm–2、2.28 t·hm–2和90.51 t·hm–2。浙江省森林生态系统土壤层碳储量和生态系统碳储量呈极显著相关关系, 说明土壤层碳储量对浙江省森林生态系统碳储量贡献较大。浙江省天然林乔木层碳密度整体表现为过熟林>成熟林>近熟林>中龄林>幼龄林, 而人工林乔木层碳密度表现为过熟林>近熟林>成熟林>中龄林>幼龄林。浙江省幼、中龄林林分面积比重较大, 占全省森林面积的76.76%, 若对现有森林进行更好的经营和管理, 可以增加浙江省森林的碳固存能力。
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