分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2019-03-05 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：构建产fusaruside的毕赤酵母菌株，解决天然小分子免疫抑制剂fusaruside的来源问题。方法：从禾谷镰刀菌Fusarium graminearum PH-1中扩增获得合成fusaruside的相关基因—3位去饱和酶（Δ3(E)-SD）和10位去饱和酶（Δ10(E)-SD）基因；并通过2A肽策略构建两种基因的共表达载体，转化到毕赤酵母GS115中进行双酶的诱导表达；对诱导后的毕赤酵母菌体进行甲醇和二氯甲烷的处理后,经高效液相色谱质谱联用仪(HPLC-MS)检测其中产物变化。结果：3位去饱和酶和10位去饱和酶在毕赤酵母中成功共表达，SDS-PAGE显示3位去饱和酶分子量约为48 kDa，10位去饱和酶分子量约为65 kDa；HPLC-MS显示重组酵母可以产生fusaruside。结论：与fusaruside原产菌株镰刀菌相比，该酵母菌的发酵时间更短，产量更高，为fusaruside的进一步开发与应用奠定基础。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 在底物精粗比为6:4的条件下，在底物中添加不同剂量[使发酵液中植物精油的浓度分别为0(对照)、50、100、200和400 mg/L]的丁子香酚、D-柠烯、茴香脑、肉桂醛、百里香酚或香芹酚，通过体外产气法比较研究不同植物精油对体外瘤胃发酵和甲烷(CH4)产量的影响。每种植物精油的每个剂量设3个重复。体外模拟瘤胃发酵培养24 h，测定产气量和气体中的CH4含量以及发酵液的pH、挥发性脂肪酸(VFA)比例和氨态氮(NH3-N)浓度。结果表明：1)除百里香酚外，添加各种植物精油对体外发酵液pH均无显著影响(P>0.05)。2)添加丁子香酚、D-柠烯、茴香脑和肉桂醛对体外发酵液总VFA浓度没有显著影响(P>0.05)，但总VFA浓度随百里香酚和香芹酚浓度的增加呈二次曲线变化(PQ0.05)，与对照组相比，400 mg/L百里香酚和香芹酚使丙酸比例显著下降(P0.05)。与对照组相比，各浓度的百里香酚和香芹酚均显著降低体外发酵24 h产气量(P0.05)。与对照组相比，50和100 mg/L的丁子香酚显著增加体外发酵24 h CH4产量(P<0.05)，而400 mg/L的百里香酚和香芹酚体外发酵24 h CH4产量分别降低84.7%(P<0.05)和73.9%(P<0.05)。综合以上试验结果可知，不同植物精油对体外瘤胃发酵和CH4产量的影响结果不同，且与添加剂量有关。其中，低剂量的百里香酚和香芹酚促进体外瘤胃发酵，而高剂量的百里香酚和香芹酚抑制体外瘤胃发酵且显著降低24 h CH4产量。
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