苹果6-磷酸山梨醇脱氢酶基因启动子逆境诱导表达特性研究

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-06-01 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

夏惠 #刘磊# 王秀 沈妍秋 郭雨伦 梁东

摘要： 为研究6-磷酸山梨醇脱氢酶（Sorbitol-6-Phosphate dehydrogenase，S6PDH）基因启动子（S6PDHp）的逆境诱导表达特性，利用Gateway技术构建了S6PDH基因启动子区 5’端系列缺失体与GUS基因的融合表达载体，并通过农杆菌介导法转化拟南芥。对转基因拟南芥进行低温和外源ABA处理，通过GUS蛋白活性变化分析S6PDHp的逆境诱导表达特性。研究结果发现，通过Gateway技术构建了4个S6PDHp 5’端系列缺失体与β-葡糖苷酸酶（GUS）基因的融合表达载体（pGWB433-S6PDHp1、pGWB433-S6PDHp2、pGWB433-S6PDHp3和pGWB433-S6PDHp4）并获得了相应的转基因拟南芥。对转基因植株进行低温处理后发现，pGWB433-S6PDHp3转基因植株中的GUS活性增幅最大，达到显著水平，而其他转基因植株中的GUS活性基本保持不变。外源ABA处理后发现，除pGWB433-S6PDHp4外，其余启动子缺失体转基因拟南芥中GUS活性显著升高。以上结果表明，低温和外源ABA能够诱导S6PDHp的表达，但不同的缺失体响应程度不同，意味着在S6PDHp序列（-2396bp至-236bp）内中可能存在着响应逆境胁迫的正负调控顺式作用元件。

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