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  • 热休克蛋白70在牦牛胃中的分布和表达

    分类: 生物学 >> 动物学 提交时间: 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》

    摘要: 本试验旨在研究牦牛热休克蛋白70(HSP70)在牦牛胃中的分布特点和表达量的差异性变化。采集8头健康成年牦牛的胃组织,采用组织学染色方法研究皱胃腺体间细胞的类型;免疫组化法和蛋白质免疫印迹(WB)法分别检测HSP70在不同胃的分布及表达量。结果表明:嗜银染色及阿利新蓝-过碘酸-雪夫(AB-PAS)染色发现,皱胃腺体间含有大量的内分泌细胞。免疫组化检测发现,在牦牛瘤胃、网胃、瓣胃,HSP70的阳性表达仅见于黏膜上皮细胞层,角质层细胞呈强阳性表达,而基底层、颗粒层和棘层的部分细胞呈中等阳性表达,部分未见阳性表达;皱胃阳性反应的范围较广,不仅黏膜表面上皮细胞有表达,胃腺间的内分泌细胞及壁细胞也呈阳性表达。且阳性反应主要集中在细胞的胞质和胞核。免疫组化和WB结果均表明,HSP70在牦牛皱胃表达量最高,瘤胃、网胃及瓣胃依次递减,部位间差异极显著(P<0.01)。综合得出,牦牛皱胃腺体间含有大量嗜银性内分泌细胞,HSP在所有胃中均有分布,且皱胃的表达量显著高于其他胃,提示HSP70可能与牦牛胃的消化吸收有一定的关联性。

  • 植物精油与丁酸钠复合制剂对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化指标、粪便菌群及氨逸失的影响

    分类: 生物学 >> 动物学 提交时间: 2018-12-20 合作期刊: 《动物营养学报》

    摘要: 本试验旨在研究植物精油与丁酸钠复合制剂对断奶仔猪生长性能、血清抗氧化指标、粪便菌群及氨逸失的影响。试验选择300头体重在(11.20±0.29) kg的28日龄健康“杜×长×大”仔猪,随机分为3组,每组4个重复,每个重复25头猪。对照组饲喂基础饲粮,植物精油组(EO组)饲喂基础饲粮+1 000 mg/kg植物精油制剂,植物精油与丁酸钠复合组(ES组)饲喂基础饲粮+1 000 mg/kg植物精油与丁酸钠复合制剂。试验期28 d。结果表明:1)与对照组相比,EO和ES组末重分别提高了2.64%(P>0.05)和3.40%(P0.05)。2)第14天时,EO和ES组血清总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P<0.05),血清丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05)。第28天时,EO组血清T-AOC显著高于对照组(P<0.05)。3)EO和ES组第7、14和21天粪便中大肠杆菌数量均显著低于对照组(P<0.05),ES组第7和14天粪便中大肠杆菌数量显著低于EO组(P<0.05)。EO和ES组第7和14天粪便中乳酸杆菌数量均显著高于对照组(P<0.05),ES组第7天粪便中乳酸杆菌数量显著高于EO组(P<0.05),ES组第21天粪便中乳酸杆菌数量显著高于对照组(P<0.05)。4)EO和ES组第14和28天粪便中氨态氮含量和脲酶活性均显著低于对照组(P<0.05)。第14天时,ES组粪便中氨态氮含量显著低于EO组(P<0.05);第28天时,ES组粪便中氨态氮含量和脲酶活性均显著低于EO组(P<0.05)。由此可见,植物精油制剂和植物精油与丁酸钠复合制剂都对仔猪生长性能、

  • 抗树鼩CD3ε单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

    分类: 生物学 >> 生物工程 提交时间: 2018-02-11 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

    摘要: 目的 制备鼠抗树鼩CD3ε单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法 以GST-CD3ε蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术融合免疫后的BALB/c小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤SP2/0细胞,通过间接ELISA方法检测,筛选出多株能分泌抗树鼩CD3ε的杂交瘤细胞株,经过3次亚克隆筛选后,制备小鼠腹水单克隆抗体,并纯化得到鼠抗树鼩CD3ε单克隆抗体,通过腹水单克隆抗体效价测定、单克隆抗体亲和力测定、单克隆抗体抗原表位分析、 Western blot和FACS分析其生物学特性。结果 筛选到5株能稳定分泌抗树鼩CD3ε单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为78I、87I、92D1、75II和35C8,腹水单克隆抗体效价分别为1:106、1:106、1:104、1:106、1:103,亲和力解离常数(Kd)分别为1.8×10-5、2.9×10-5、4.9×10-5、7.3×10-5、3.6×10-5。5株单克隆抗体抗原表位分析显示78I、87I和75II识别同一抗原表位,而92D1和35C8识别另一抗原表位。经Western blot检测,HRP标记后的92D1能识别GST-CD3ε蛋白和树鼩PBMC,并对大鼠、小鼠和猴的PBMC有抗体交叉反应。经FACS检测,PE-Cy5.5标记后的92D1能特异性识别树鼩PBMC。结论 成功制备出鼠抗树鼩CD3ε的单克隆抗体,为进一步应用于树鼩免疫检测奠定基础。