分类： 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间： 2019-10-17 合作期刊: 《广西植物》
摘要： 建立马尾松种子超低温保存技术体系，为其种质资源的长期保存提供技术支持。利用液氮将不同含水量的无菌马尾松种子（27.4%、24.6%、22.7%、16.8%、15.8%、10.7%、7.5%、6.1%、4.8%、3.2%）进行超低温保存。结果显示：1.在3.2%-6.1%含水量范围内，经液氮冷冻保存后的发芽率随含水量升高逐渐升高，在含水量6.1%时，发芽率达到最大值91.33%；当含水量大于6.1%时，发芽率逐渐下降，尤其是当含水量大于15.8%时，发芽率迅速下降；在3.2%-7.5%含水量范围内冻存后发芽率达80%以上。2.冷冻、化冻方式影响超低温保存效果。种子无需低温预冷，直接投入液氮保存（快速冷冻）效果最好；室温空气化冻（缓慢化冻）较42 ℃水浴化冻发芽率高，且后者容易发生种皮炸裂现象。3.种皮对马尾松种子超低温保存过程起到保护作用，使其免受机械损伤，去掉外种皮的种子冻存后发芽率显著下降，且容易出现形态不正常的幼苗。4.超低温保存对马尾松种子萌发具有一定“刺激”作用，在最适含水量6.1%时，经超低温保存后种子的发芽率显著大于对照种子。总之，含水量、冷冻方法、化冻方法、种皮结构显著影响超低温保存效果，马尾松种子超低温保存的最优方法是将种子含水量控制在6.1%，直接投入液氮快速冷冻后室温空气缓慢化冻，冻后发芽率可达90%以上。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-01-16 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：利用烟草遗传转化体系，研究尾叶桉（Eucalyptus urophylla）咖啡酸氧甲基转移酶基因（EuCOMT）和咖啡酰CoA氧甲基转移酶（EuCCoAOMT）基因对木质素单体合成的定向调控效果。方法：分别利用EuCOMT的正义片段、EuCCoAOMT的全长RNAi片段进行单基因和二价基因的烟草转化研究，并对转基因烟草植株中目标基因表达水平、木质素和纤维素的含量、茎部解剖结构以及木质素单体含量进行检测。结果：分别获得了转基因植株C-S（转EuCOMT正义片段）、CR（转EuCCoAOMT全长RNAi片段）、C-CR（EuCOM和EuCCoAOMT二价基因转化）。烟草中转入的正义EuCOMT的片段能够正常表达，而EuCCoAOMT的全长RNAi片段对烟草CCoAOMT基因引发了强烈的抑制。转基因烟草的生长形态、木质素、纤维含量以及解剖结构与野生型无显著差异。转基因植株C-S中G木质素含量升高17.72%，S/G比值降低17.99%；CR中S/G比值升高61.62%，C-CR中G木质素降幅达到57.38%，S/G比值升幅达到114.94%。结论：抑制CCoAOMT对G木质素合成具有显著的抑制效果，EuCOMT和EuCCoAOMT二价基因转化对S/G比值的定向调控效果最为理想。
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