分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在探讨硒蛋白X（SelX）基因沉默和过氧化氢（H2O2）处理对人正常肝脏细胞（LO2）中硒蛋白基因表达和抗氧化酶活性的影响，为探索SelX与其他硒蛋白之间的调控关系及SelX的功能奠定基础。对本实验室保存的SelX基因稳定沉默LO2细胞株（siSelX）和对照细胞株（CK），利用噻唑兰（MTT）法比较其生长速率；siSelX和CK用200 μmol/L H2O2处理2.5 h后，采用荧光定量PCR技术考察25个硒蛋白基因的表达量；同时比较SelX基因沉默以及H2O2处理对LO2细胞株中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及总抗氧化能力（T-AOC）的影响。结果显示：1）SelX基因沉默显著降低了LO2细胞株的生长速率（P<0.05）；2）SelX基因沉默显著上调了Gpx6、Txnrd2、Seli基因的表达量（P<0.05），显著下调了Dio2、Dio3、Selm、Sepw1基因的表达量（P<0.05）；H2O2处理显著上调了Dio1基因的表达量（P<0.05），显著下调了Gpx2基因的表达量（P<0.05）；SelX基因沉默后H2O2处理显著上调了Gpx6、Txnrd2、Dio1基因的表达量（P<0.05），显著下调了Txnrd3、Dio2、Selm、Sepw1、Selv基因的表达量（P<0.05）；3）SelX基因沉默显著提高了LO2细胞株GSH-Px活性（P<0.05），显著提高了SOD的活性（P<0.05）；SelX基因沉默后H2O2处理显著提高了GSH-Px活性（P<0.05）。由此可见，SelX基因沉默降低了LO2细胞株的生长速率，SelX基因沉默后H2O2处理影响部分硒蛋白基因在细胞中的表达量，同时也影响了GSH-Px、SOD活性。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在克隆、鉴定猪硒蛋白P基因（Sepp1），并探明其在猪不同组织中的mRNA相对表达量，为以猪为模型研究硒蛋白P（SelP）的功能奠定基础。根据表达序列标签（EST）序列设计引物，利用cDNA末端快速克隆（3′-RACE）技术从猪肝脏总RNA中扩增出含开放阅读框（ORF）至polyA片段，然后与EST序列进行拼接；采用荧光定量PCR技术考察Sepp1在猪9个组织中的mRNA相对表达量。结果显示：1）扩增出共1 707 bp的片段，测序后与EST拼接获得了2 109 bp的猪Sepp1序列，并提交至NCBI GenBank数据库，序列号为EF113596.2；该基因1 170 bp的ORF编码区和对应的氨基酸残基与人相应序列分别有83.72%和75.64%序列同源性，其编码390个氨基酸，含有14个硒代半胱氨酸（Sec）残基，分别位于第59、267、286、309、311、327、339、352、354、361、376、378、385和387位。2）Sepp1 mRNA在猪组织中广泛分布，在肝脏中具有最高分布，依次为甲状腺>肾脏>睾丸>下丘脑>脾脏>垂体>心脏>肌肉。本试验成功克隆、鉴定了猪Sepp1，检测了其在猪不同组织中表达分布情况，为其进一步以猪为模型探讨其功能奠定了基础。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： Nesfatin-1是新近发现的一种厌食神经肽，在中枢主要位于下丘脑和脑干，在外周主要分布于胃、肠、胰岛和性腺，其表达受到营养、生理、病理和其他摄食激素的调节。Nesfatin-1在中枢神经元和外周细胞中与多种激素协同参与摄食和血糖稳衡等能量代谢过程，并激活下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA）参与应激反应，还能作用于HPA影响发育期的启动。本文重点对nesfatin-1在中枢和外周的分布、影响其表达的因素以及生物学功能进行了综述。
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