分类： 生物学 >> 植物学 >> 应用植物学 提交时间： 2023-12-24 合作期刊: 《广西植物》
摘要： 为探究单氰胺破除葡萄休眠的生理生化响应及分子调控机理，该研究以‘水晶’葡萄 （Vitis vinifera×V. labrusca ‘Shuijing’）为试验材料，测定单氰胺处理‘水晶’葡萄后芽内SOD、 POD 和CAT 活性、MDA 和H2O2 含量及氧自由基产生速率的变化，并通过RT-PCR 技术克 隆得到其葡萄芽的2 个FT（Flowering locus T）基因（VvFT1 和VvFT2）和1 个CBF（C-repeat binding factor）基因（VvCBF）的全长cDNA 序列，分析其理化性质、系统进化、保守基序 及结构域和单氰胺处理后其在葡萄芽中的表达水平差异等。结果表明：（1）生理生化指标 测定分析表明，单氰胺处理后葡萄芽内SOD、POD 和CAT 活性、MDA 和H2O2 含量及氧自 由基产生速率均明显增加。（2）‘水晶’葡萄VvFT1 和VvFT2 的cDNA 全长为525 bp，编码 174 aa；VvCBF 的cDNA 全长为714 bp，编码237 aa。（3）同源性分析表明，‘水晶’葡萄 VvFT1 与荔枝（Litchi chinensis，LcFT：AEU08960.1）和龙眼（Dimocarpus longan，DlFT2： ALA55998.1）的氨基酸同源性最高，VvFT2 与LcFT（AEU08961.1）和DlFT2（AHF27444.1） 的氨基酸同源性最高，系统进化分析表明VvFT1、VvFT2 、LcFT（AEU08960.1；AEU08961.1） 和DlFT2（ALA55998.1；AHF27444.1）聚为一支，亲缘关系最近；VvCBF 与野扁桃（Prunus ledebouriana，PlCBF：AEB69782.1）的氨基酸同源性最高，系统进化分析表明VvCBF 和 PlCBF 聚为一支，亲缘关系最近。（4）qRT-PCR 分析表明，单氰胺处理后葡萄芽中VvFT1、 VvFT2 基因的表达量显著增加，而VvCBF 基因的表达量显著降低。综上所述，该研究较为 全面地分析了VvFT1、VvFT2 和VvCBF 基因的系统进化和单氰胺处理后葡萄芽内各基因表 达模式及生理生化指标变化，为单氰胺破除葡萄休眠的研究奠定了理论基础。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-12-06 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： T淋巴细胞受体（TCRs）在抗原识别免疫应答中作用重要，其多样性与宿主免疫反应及肿瘤预后判断密切相关。目的：采用高通量测序技术研究前列腺癌组织和癌旁组织中T细胞受体（TCR）克隆多样性及其克隆序列。方法：收集5例PC患者的癌组织和癌旁组织，提取DNA后经多重PCR技术对TCR β链CDR3区进行扩增。用Illumina MiSeq进行测序，经过数据处理和比对分析，比较前列腺癌组织TCR CDR3组库的组成特征。结果：前列腺癌组织具有更高程度的克隆百分比和较高的高度扩增克隆比HEC（HEC：频率>样本总读数的0.5%的TCR克隆），并获得了24对在癌组织样本中差异表达的V-J基因组合、16对在癌旁组织样本中差异表达的V-J基因组合。结论：前列腺癌组织与癌旁组织均存在差异性的V-J基因组合以及高克隆表达的HEC，其中癌组织样品具有更高的HEC。本研究对PC发生发展的免疫学研究提供了新的数据，对PC免疫监视、T细胞受体变异标志等研究提供了参考，对以后继续研究打下了基础。
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