分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-25 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳糖合成相关基因表达的影响，深入探讨Lys对乳糖合成的影响机理。将第3代BMECs随机分为6个组，每组6个重复，各组细胞培养液中Lys的添加浓度分别为0.5（对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，细胞在37 ℃、5% CO2条件下培养48 h。结果表明：适宜浓度Lys对乳糖含量和葡萄糖转运载体蛋白1（GLUT1）、已糖激酶I（HKI）和已糖激酶II（HKⅡ）基因表达量的影响呈显著的剂量依赖关系（P<0.05）；方差分析结果显示，添加Lys显著或趋于显著影响乳糖含量及乳糖合成相关基因表达。与对照组相比，2.0~16.0 mmol/L组乳糖含量较高（P=0.055），4.0~16.0 mmol/L组GLUT1基因表达量显著升高（P<0.001），2.0~8.0 mmol/L组α-乳清白蛋白（LALBA）和β-1,4-半乳糖基转移酶-1（β-4GALT1）基因表达量显著升高（P=0.006和P<0.001），8.0~16.0 mmol/L组HKⅡ基因表达量显著升高（P<0.001）；但1.0~2.0 mmol/L组HKⅡ基因表达量显著下降（P<0.001），4.0~16.0 mmol/L组HKI基因表达量下降，尤以16.0 mmol/L Lys显著低于对照组（P=0.002）。综上所述，Lys对乳糖含量和GLUT1、HKI和HKⅡ基因表达量的影响存在显著的剂量依赖，Lys浓度为2.0~8.0 mmol/L时，对BMECs内乳糖合成促进效果较好。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究维生素A对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂和乳蛋白合成相关基因表达的影响。采用单因素完全随机试验设计，将第3代BMECs随机分为6个处理，每个处理6个重复，使用无血清培养基饥饿24 h后，采用维生素A浓度分别为0（对照）、0.05、0.10、0.20、1.00和2.00 μg/mL的培养基培养24 h。结果表明：与对照组相比，1.00、2.00 μg/mL维生素A可以显著提高相对增殖率以及甘油三酯（TG）含量（P<0.05）；维生素A能显著提高乳脂合成相关基因过氧化酶体增殖物激活受体γ（PPARG，0.05、0.10、0.20、1.00和2.00 μg/mL）、固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1，0.05、0.10 µg/mL）、硬脂酰辅酶A去饱和酶（SCD，0.05、0.10 µg/mL）的基因表达量（P<0.05）；维生素A也能显著提高乳蛋白合成相关基因信号转导转录激活因子5（STAT5，0.20 μg/mL）、αs1-酪蛋白（CSN1S1，0.05和0.10 μg/mL）、κ-酪蛋白（CSN3，0.10 μg/mL）基因表达量（P<0.05）；维生素A也能显著提高乳脂合成相关酶乙酰辅酶A羧化酶（ACACA）活性（0.05、0.10、0.20和1.00 μg/mL）（P<0.05）。结果提示，维生素A对BMECs内乳脂、乳蛋白合成相关基因表达的促进效果呈浓度依赖性，以0.10 μg/mL维生素A效果较好
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳蛋白合成相关基因表达和蛋白磷酸化的影响，深入探讨Lys对乳蛋白合成影响的机理。将第3代BMECs随机分为6组，各组Lys的浓度分别为0.5（对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，每组6个重复。37 ℃、5% CO2培养48 h，之后采用化学发光法测定BMECs内三磷酸腺苷（ATP）的含量，采用实时荧光定量PCR法测定乳蛋白合成相关基因表达量以及采用蛋白质免疫印迹法测定乳蛋白合成相关蛋白的磷酸化水平。结果表明：随着Lys浓度的增加，ATP含量呈趋于显著的二次曲线升高（P=0.050）;κ-酪蛋白（CSN3）（P=0.093）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）（P=0.005）、真核起始因子4E（eIF4E）（P=0.076）和磷酸腺苷活化的蛋白激酶α1（AMPKα1）基因表达量（P=0.045）呈显著或趋于显著的二次曲线变化，均为先升高后降低；α-酪蛋白（CSN1S1）基因表达量（P=0.081）及mTOR（P=0.038）和p70核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）磷酸化水平（P=0.022）呈显著或趋于显著的一次线性降低；磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平呈显著的一次线性升高（P=0.014）。方差分析结果显示，添加Lys显著影响ATP含量、乳蛋白合成相关基因表达量及eIF4E磷酸化水平（P<0.05），其中，ATP含量以2.0~16.0 mmol/L组，CSN1S1、β-酪蛋白（CSN2）、信号转导和转录激活因子5（STAT5）以1.0~2.0 mmol/L组，mTOR基因表达量以1.0~8.0 mmol/L组，CSN3基因表达量以1.0~4.0 mmol/L组，酪氨酸激酶2（JAK2）基因表达量以1.0~16.0 mmol/L组，S6K1基因表达量以2.0 mmol/L组，eIF4E基因表达量以2.0~8.0 mmol/L组，eIF4E磷酸化水平以2.0~4.0 mmol/L组时促进效果较好，但16.0 mmol/L组CSN1S1、CSN3、STAT5及mTOR基因表达量受到抑制，1.0~16.0 mmol/L组真核起始因子4E结合蛋白1（4EBP1）基因表达量受到抑制。总之，Lys浓度为1.0~2.0 mmol/L时，对BMECs内乳蛋白合成相关基因表达的促进效果较好。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 壳聚糖及其衍生物是通过酶和酸性水解过程降解甲壳素的产物，由于壳聚糖的生物相容性和无毒性，使其具有潜在的生物应用价值。本文主要综述了壳聚糖及其衍生物的抗氧化和抗炎症作用，并从体内免疫调节因子、核因子κB（NF-κB）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路和调节脂类代谢的角度综述了其可能的机理，为壳聚糖及其衍生物进一步的开发和利用提供了理论依据。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 乳蛋白前体物主要有游离氨基酸和小肽等。氨基酸不仅能影响乳腺内乳蛋白的合成，而且对乳脂的合成起一定的调控作用。本文主要阐述了氨基酸在乳脂合成过程中的调节作用，并从乳腺对乳脂前体物的摄取规律、乳脂合成相关基因表达、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白和腺苷酸活化蛋白激酶信号通路的角度综述了氨基酸对乳脂合成的可能机理，为进一步研究乳脂合成机理及改进牛奶营养品质提供理论依据。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究蛋氨酸（Met）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂合成相关基因和蛋白表达的影响，以探讨Met对乳脂合成的影响机理。将第3代BMECs随机分为6个处理（每个处理6个重复），培养液中Met浓度分别为0.13、0.26、0.39、0.52、0.65和0.78 mmol/L。在37 ℃、5% CO2条件下培养48 h后测定BMECs内甘油三酯（TG）的含量及乳脂合成相关基因和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）与固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）蛋白的相对表达量。结果显示：Met浓度对BMECs内TG含量无显著影响（P>0.05）。0.52~0.78 mmol/L Met处理BMECs内脂肪酸结合蛋白3（FABP3）、乙酰辅酶A羧化酶A（ACACA）和PPARγ基因的相对表达量均显著高于其他处理（P<0.05）。BMECs内脂蛋白脂酶（LPL）基因的相对表达量以0.26~0.39 mmol/L Met处理较高，显著高于0.65~0.78 mmol/L Met处理（P<0.05）。脂肪酸合成酶（FASN）基因的相对表达量以0.39~0.52 mmol/L Met处理在数值上较高，且0.52 mmol/L Met处理显著高于0.13~0.26 mmol/L和0.65~0.78 mmol/L Met处理（P<0.05）。Met浓度可显著影响SREBP1和乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6（AGPAT6）基因及SREBP1和PPARγ蛋白的表达（P<0.05），均以0.26 mmol/L Met处理的相对表达量最高。结果表明，Met浓度影响BMECs内脂肪酸摄取、从头合成的基因的表达及乳脂合成调控因子PPARγ和SREBP1的基因和蛋白的表达，Met浓度为0.26~0.52 mmol/L时对BMECs内脂肪酸从头合成及长链脂肪酸摄取的促进效果较好。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究含蛋氨酸（Met）二肽对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验分3部分，均采用单因子完全随机试验设计，Met的添加浓度及培养时间分别为60 μg/mL（0.402 mmol/L）、48 h。第1部分，培养液添加8种含Met二肽[蛋氨酸-蛋氨酸(P-Met-Met)、蛋氨酸-赖氨酸(P-Met-Lys)、蛋氨酸-色氨酸(P-Met-Trp)、蛋氨酸-苯丙氨酸(P-Met-Phe)、蛋氨酸-苏氨酸(P-Met-Thr)、蛋氨酸-异亮氨酸(P-Met-Ile)、蛋氨酸-亮氨酸(P-Met-Leu)、蛋氨酸-缬氨酸(P-Met-Val)]，以不添加二肽为对照，测定BMECs乳蛋白合成相关基因（αs1-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、β-乳球蛋白、Ⅱ型小肽转运载体和氨肽酶氮）的表达量；第2部分，培养液添加8种与上述二肽对应的游离氨基酸（F-Met-Met、F-Met-Lys、F-Met-Trp、F-Met-Phe、F-Met-Thr、F-Met-Ile、F-Met-Leu、F-Met-Val），以不添加游离氨基酸为对照，测定BMECs乳蛋白合成相关基因的表达量；第3部分，用二肽等物质的量替代相应游离氨基酸，测定BMECs乳蛋白合成相关基因的表达量以及细胞内外氨肽酶含量。结果表明：P-Met-Met和P-Met-Lys组较对照组和其他二肽组上调了αs1-酪蛋白和β-酪蛋白基因的表达量，且P-Met-Met组优于P-Met-Lys组。F-Met-Met和F-Met-Lys组较对照组和其他游离氨基酸组显著提高了αs1-酪蛋白基因的表达量（P<0.05）。除P-Met-Val和P-Met-Leu组外，其他二肽替代游离氨基酸后均不同程度地提高了乳蛋白和Ⅱ型小肽转运载体基因的表达量，其中P-Met-Met表现出较好的促进效果。总之，含Met二肽等量替代对应的游离氨基酸能够促进乳蛋白基因的表达，其中尤以P-Met-Met的效果最好。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究亮氨酸（Leu）对泌乳奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂合成相关基因和蛋白表达的影响，以探讨Leu对乳脂合成的影响机理。将第3代BMECs随机分为6个处理，每个处理6个重复。6个处理培养液中Leu浓度分别为0.45、0.90、1.80、2.70、3.60和7.20 mmol/L ，37 ℃、5% CO2培养48 h后测定BMECs内甘油三酯（TG）的含量及乳脂合成相关基因和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）与固醇调节元件结合蛋白（SREBP1）蛋白的的相对表达量。结果显示：Leu浓度对BMECs内TG含量无显著影响（P>0.05）。适宜浓度的Leu显著促进脂肪酸合成酶（FASN）和乙酰辅酶A羧化酶A（ACACA）基因的表达(P<0.05)，FASN基因的相对表达量以1.80~2.70 mmol/L Leu处理、ACACA基因的相对表达量以1.80~7.20 mmol/L处理较高。Leu浓度显著影响BMECs内SREBP1基因及蛋白表达（P<0.05），以1.80 mmol/L Leu的促进效果最好。虽然Leu显著抑制BMECs内脂肪酸结合蛋白3（FABP3）、脂蛋白脂酶（LPL）、乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6(AGPAT6)、线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶（GPAM）和嗜乳脂蛋白亚家族1成员1（BTN1A1）基因的表达（P<0.05），但只有高浓度（3.60~7.20 mmol/L）的Leu抑制作用较大。综合来看，Leu浓度影响BMECs乳脂合成相关基因及PPARγ和SREBP1蛋白的表达。Leu浓度为1.80~2.70 mmol/L时，对脂肪酸从头合成相关基因及调控因子SREBP1蛋白表达的促进效果较好，对TG合成及脂滴形成相关基因表达的抑制作用较小。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂肪合成相关基因和蛋白表达的影响，探讨Lys影响乳脂肪合成的机理。将第3代BMECs随机分为6组，每组6个重复,每个重复1个培养孔。各组培养基中Lys的浓度分别为0.5（基础培养基，对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，37 ℃、5% CO2培养48 h后测定BMECs甘油三酯（TAG）含量、乳脂肪合成相关基因和蛋白的表达量。结果表明：BMECs内TAG含量（P=0.013）以及脂肪酸结合蛋白3（FABP3，P=0.001）、脂蛋白脂酶（LPL，P=0.096）、脂肪酸合成酶（FASN，P=0.003）、乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6（AGPAT6，P=0.038）和甘油-3-磷酸酰基转移酶（GPAM，P=0.022）基因表达量对Lys呈显著或趋于显著的浓度依赖效应。FABP3基因表达量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组和LPL基因表达量以1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组显著高于0.5 mmol/L组（P<0.05）；FASN基因表达量以2.0 mmol/L组最高，显著高于16.0 mmol/L组（P<0.05）；硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）基因表达量以2.0、4.0 mmol/L组显著高于其他组（P<0.05）；磷脂酸磷酸酯酶1（LPIN1）、嗜乳脂蛋白亚家族1成员1（BTN1A1）和黄嘌呤脱氢酶（XDH）基因表达量均以1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L组显著高于0.5 mmol/L组（P<0.05）；过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因及蛋白表达量均以2.0、4.0 mmol/L组显著高于0.5和8.0、16.0 mmol/L组（P<0.05）；固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）基因表达量以1.0、2.0、4.0 mmol/L组显著高于其他组（P<0.05），蛋白表达量以1.0组显著高于其他组（P<0.05）。但高浓度Lys抑制AGPAT6和GPAM的基因表达，AGPAT6基因表达量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组显著低于0.5、1.0 mmol/L组（P<0.05），GPAM基因表达量以16.0 mmol/L组显著低于0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L组（P<0.05）。可见，Lys对BMECs的乳脂肪合成具有显著的促进效果，但高浓度的Lys抑制了乳脂肪合成相关基因的表达。本试验条件下，培养基中Lys适宜浓度为2.0~4.0 mmol/L。
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