分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-25 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验以脂多糖（LPS）诱导的小鼠腹腔巨噬细胞为炎症模型，旨在研究沙葱总黄酮的抗炎作用。应用CCK-8法筛选沙葱总黄酮对小鼠腹腔巨噬细胞活力具有促进作用的浓度，在此基础上设置对照组、LPS组（应激模型，1 μg/mL LPS）、沙葱总黄酮低剂量组（25 μg/mL沙葱总黄酮+1 μg/mL LPS）、沙葱总黄酮中剂量组（50 μg/mL沙葱总黄酮+1 μg/mL LPS）、沙葱总黄酮高剂量组（100 μg/mL沙葱总黄酮+1 μg/mL LPS）。用Griess法测定细胞上清液中一氧化氮（NO）含量；用酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素（IL）-6、IL-1β、IL-10含量；用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达量。结果表明：1）与对照组相比，沙葱总黄酮的添加浓度在25.0~100.0 μg/mL均能显著提高细胞增殖率（P<0.05）；2）与对照组相比，LPS组能显著提高细胞上清液NO的含量（P<0.05）；与LPS组相比，不同浓度沙葱总黄酮均能显著抑制NO的产生（P<0.05）；3）与对照组相比，LPS组的细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10含量以及细胞中基因表达量均显著提高（P<0.05）；与LPS组相比，除了低剂量组IL-1β外，25、50、100 μg/mL沙葱总黄酮浓度显著降低细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量（P<0.05），除了低剂量组IL-10外，显著增加IL-10含量（P<0.05）；除了低剂量组iNOS外，25、50、100 μg/mL沙葱总黄酮浓度显著抑制细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS mRNA的表达（P<0.05），有促进IL-10 mRNA表达的趋势，但差异不显著（P˃0.05）。综上，沙葱总黄酮对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞具有显著的抗炎作用。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-11-07 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究蛋氨酸三肽（Met-Met-Met）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）酪蛋白和小肽转运载体基因表达量的影响。采用酶消化法培养的第3代奶牛乳腺上皮细胞为模型，各处理在培养基中分别添加0（对照）、40、50、60、70和80 μg/mL的蛋氨酸三肽，每个处理5个重复，每个重复1个培养孔，分别培养细胞24、48和72 h，检测奶牛乳腺上皮细胞的相对增殖率，整体试验重复2次，确定最佳培养时间；各处理在培养基中分别添加0（对照）、40、50、60、70和80 μg/mL的蛋氨酸三肽，每个处理3个重复，每个重复1个培养孔，以最佳培养时间培养，用实时定量PCR法检测酪蛋白基因的表达量，确定适宜蛋氨酸三肽浓度，整体试验重复3次；以最佳培养时间和适宜蛋氨酸三肽浓度培养细胞，以未添加蛋氨酸三肽的培养基为对照，每个处理3个重复，每个重复1个培养孔，测定小肽转运载体基因的表达量，整体试验重复3次。结果表明：在培养基中添加蛋氨酸三肽培养奶牛乳腺上皮细胞24 h时，相对增殖率最高；培养基中加入60 μg/mL的蛋氨酸三肽培养细胞24 h，αs1-酪蛋白和β-酪蛋白的基因表达量最高，同时发现奶牛乳腺上皮细胞中小肽转运载体1和小肽转运载体2基因表达量显著高于对照处理（P<0.05）。综上所述，培养基中添加60 μg/mL的蛋氨酸三肽能够提高奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白和肽转运载体基因的表达量。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究蛋氨酸三肽（Met-Met-Met）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）酪蛋白和小肽转运载体基因表达量的影响。采用酶消化法培养的第3代奶牛乳腺上皮细胞为模型，各处理在培养基中分别添加0（对照）、40、50、60、70和80 μg/mL的蛋氨酸三肽，每个处理5个重复，每个重复1个培养孔，分别培养细胞24、48和72 h，检测奶牛乳腺上皮细胞的相对增殖率，整体试验重复2次，确定最佳培养时间；各处理在培养基中分别添加0（对照）、40、50、60、70和80 μg/mL的蛋氨酸三肽，每个处理3个重复，每个重复1个培养孔，以最佳培养时间培养，用实时定量PCR法检测酪蛋白基因的表达量，确定适宜蛋氨酸三肽浓度，整体试验重复3次；以最佳培养时间和适宜蛋氨酸三肽浓度培养细胞，以未添加蛋氨酸三肽的培养基为对照，每个处理3个重复，每个重复1个培养孔，测定小肽转运载体基因的表达量，整体试验重复3次。结果表明：在培养基中添加蛋氨酸三肽培养奶牛乳腺上皮细胞24 h时，相对增殖率最高；培养基中加入60 μg/mL的蛋氨酸三肽培养细胞24 h，αs1-酪蛋白和β-酪蛋白的基因表达量最高，同时发现奶牛乳腺上皮细胞中小肽转运载体1和小肽转运载体2基因表达量显著高于对照处理（P<0.05）。综上所述，培养基中添加60 μg/mL的蛋氨酸三肽能够提高奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白和肽转运载体基因的表达量。
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