分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2019-03-05 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 【目的】 通过研究miR-17-5p对自噬相关基因ATG7的靶向调控机制和对细胞自噬的作用，探究miR-17-5p在结核分枝杆菌介导的自噬途径中的作用及其机制。【方法】 生物信息学分析得到miR17-5p的靶基因ATG7，通过成功构建载体ATG7野生型（pMirGLO-ATG7-3'UTR-WT）和突变型，利用双荧光素酶报告系统、Western blot验证miR-17-5p和ATG7的靶向关系，同时构建结核分枝杆菌（H37Ra）感染的人源性THP-1巨噬细胞模型，将做不同处理的细胞分为三组：miR-17-5p mimics，miR-17-5p inhibitor，miR-17-5p nc。通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）检测H37Ra感染对miR-17-5p表达量的影响，并且进一步通过Western blot、免疫荧光观察检测LC3蛋白的表达量和自噬小体的数量。【结果】 MTB感染能够引起miR-17-5p的下调，随着感染复数的增加有明显的降低。而生物信息学预测结果显示miR-17-5p与ATG7具有靶向性，双荧光素酶报告实验、Western blot验证miR-17-5p能够和ATG7靶向结合，并对其进行负调控。进一步通过Western blot，免疫荧光观察发现miR-17-5p mimics组LC3Ⅱ的表达下调，自噬小体表达降低，而miR-17-5p inhibitor组相反。其中对H37Ra感染组与未感染组之间比较，ATG7和LC3Ⅱ蛋白表达明显增强。【结论】 miR-17-5p直接靶向结合ATG7 3'UTR抑制自噬，在巨噬细胞抗MTB过程中发挥作用。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在评定不同葡萄籽酿酒残渣水平全混合日粮（TMR）在育肥羊瘤胃内的有效降解率。选取3只安装永久性瘤胃瘘管、平均体重为（35.0±3.7） kg的哈萨克去势公羊作为试验动物，共进行5期试验，各期分别以5种不同葡萄籽酿酒残渣水平[0(TMR1)、4.17%(TMR2)、8.33%(TMR3)、12.50%(TMR4)、16.67%(TMR5)]的TMR进行瘤胃灌注试验，按葡萄籽酿酒残渣水平由低到高依次进行。每期15 d，其中第1~7天为预试期，第8~12天为连续灌注期，第13~15天为采样期。同时在每期的第13~15天进行尼龙袋试验。采用醋酸镱（Yb-ac）作为食糜标记物，绘制浓度衰减曲线并利用非线性回归法来拟合外流速度；评定干物质（DM）、有机物（OM）及粗蛋白质（CP）的降解动力学参数，计算瘤胃有效降解率。结果表明，葡萄籽酿酒残渣水平与瘤胃食糜外流速度之间呈显著正相关的直线关系（r=0.607 0,P<0.05）；DM、OM和CP的有效降解率均随着TMR葡萄籽酿酒残渣水平的增加而先下降后趋于稳定或略有上升，TMR4组和TMR5组均显著低于TMR1组（P<0.05）;5种TMR均为瘤胃能氮负平衡型，瘤胃能氮平衡(RENB)值均随葡萄籽酿酒残渣水平的增加呈线性下降趋势（P=0.005 5）。总之，育肥羊TMR中葡萄籽酿酒残渣的适宜水平为8.33%~12.5
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在评定不同葡萄籽酿酒残渣水平全混合日粮（TMR）在育肥羊瘤胃内的有效降解率。选取3只安装永久性瘤胃瘘管、平均体重为（35.0±3.7） kg的哈萨克去势公羊作为试验动物，共进行5期试验，各期分别以5种不同葡萄籽酿酒残渣水平[0(TMR1)、4.17%(TMR2)、8.33%(TMR3)、12.50%(TMR4)、16.67%(TMR5)]的TMR进行瘤胃灌注试验，按葡萄籽酿酒残渣水平由低到高依次进行。每期15 d，其中第1~7天为预试期，第8~12天为连续灌注期，第13~15天为采样期。同时在每期的第13~15天进行尼龙袋试验。采用醋酸镱（Yb-ac）作为食糜标记物，绘制浓度衰减曲线并利用非线性回归法来拟合外流速度；评定干物质（DM）、有机物（OM）及粗蛋白质（CP）的降解动力学参数，计算瘤胃有效降解率。结果表明，葡萄籽酿酒残渣水平与瘤胃食糜外流速度之间呈显著正相关的直线关系（r=0.607 0,P<0.05）；DM、OM和CP的有效降解率均随着TMR葡萄籽酿酒残渣水平的增加而先下降后趋于稳定或略有上升，TMR4组和TMR5组均显著低于TMR1组（P<0.05）;5种TMR均为瘤胃能氮负平衡型，瘤胃能氮平衡(RENB)值均随葡萄籽酿酒残渣水平的增加呈线性下降趋势（P=0.005 5）。总之，育肥羊TMR中葡萄籽酿酒残渣的适宜水平为8.33%~12.5
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-20 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究开食料必需氨基酸（赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸）部分扣除对断奶湖羊羔羊屠宰性能和不同部位氨基酸含量的影响。选取50日龄断奶湖羊公羊100只随机分为5组，每组4个重复，每个重复5只羊。对照（PC）组饲喂氨基酸平衡的开食料，4个试验组开食料在PC组的基础上分别扣除30% Lys、Met、Thr和Trp，分别作为PD-Lys、PD-Met、PD-Thr和PD-Trp组，其余氨基酸含量保持一致。预试期为11 d，正试期为60 d。在120日龄每组随机选取6只羔羊进行屠宰。结果表明：1）PD-Lys和PD-Met组与PC组相比空体重、皮毛重、胴体重、蹄重显著降低（P<0.05）；2）PD-Met组胴体粗蛋白质含量显著低于PC和PD-Trp组（P<0.05），PC、PD-Lys和PD-Met组皮毛粗脂肪含量显著低于PD-Thr和PD-Trp组（P<0.05），PC组胴体粗脂肪含量显著低于其他各组（P<0.05），PD-Met组头蹄水分含量显著低于PC和PD-Lys组（P<0.05）；3）PD-Met组头蹄、皮毛的必需氨基酸和非必需氨基酸及胴体必需氨基酸含量显著低于PC组（P<0.05）。综合以上结果得到，61~120日龄断奶湖羊赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和色氨酸4种必需氨基酸理想模式如下：胴体为100:35:44:13，皮毛为100:21:129:11，头蹄为100:34:70:7
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-05-16 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： β2糖蛋白Ⅰ ( beta 2- glycoprotein Ⅰ，β2GPⅠ ) 是抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome，APS) 血清中抗磷脂抗体(antiphospholipid antibody，aPL)的主要抗原。β2GPⅠ 通过第五结构域与阴性磷脂oxLDL结合，进而被aPL识别，是APS动脉血栓发生的关键事件。本研究构建了编码β2GPⅠ第五结构域（ß2GPⅠ-DⅤ）、ß2GPⅠ-DⅤ突变体及ß2GPⅠ-DⅤ的Phe280-Ala320片段的原核表达载体，对其进行诱导表达和纯化，解析了ß2GPⅠ-DⅤ与阴性磷脂结合的分子机制，结果表明，β2GPI-DV中Cys281-Cys288以及Ser311-Lys317区段在空间上维持一定构型是与CL结合所必须的前体条件，而C245-C296，C288-C326两个二硫键在维持二者空间构型方面起到一定的作用。在此基础上，我们进一步检测了具有结合CL生物学活性的rDV结合oxLDL以及APS血清中oxLDL的活性，表明rDV具有与天然β2GPⅠ相一致的生物学活性。本研究获得的rß2GPⅠ-DⅤ，以及与oxLDL结合的方法体系的建立，为APS早期实验室诊断奠定基础。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-11 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究牧区冬春季低质粗饲料供给下，补饲不同钙、磷水平的精料补充料对断奶羔羊生长性能、血清指标及骨成分的影响。选取（30±2）日龄、体重为（12.50±1.21） kg断奶乌珠穆沁羔羊96只，随机分成3组，每组32只，公母各占1/2，3组羔羊分别补饲相同钙磷比、不同钙、磷水平的3种精料补充料，分别为A组（钙0.40%、磷0.38%）、B组（钙0.50%、磷0.48%）和C组（钙0.68%、磷0.65%），试验期55 d，其中预试期5 d，正试期50 d。结果表明：随着精料补充料钙、磷水平的增加，羔羊总采食量、平均日增重没有显著变化（P>0.05），平均日增重接近200 g/d；试验第50天，各组羔羊血清钙、甲状旁腺素含量及碱性磷酸酶活性也无显著性差异（P>0.05），C组羔羊血清磷含量显著高于A组和B组（P˂0.05）；C组羔羊胫骨钙含量显著高于A组（P˂0.05），与B组差异不显著（P>0.05），各组羔羊胫骨磷含量无显著差异（P>0.05）。由此可见，在牧区冬春季枯草期，不同钙、磷水平的精料补充料未对乌珠穆沁羔羊的生长性能、部分血清指标及胫骨磷含量产生显著影响，精料补充料中钙0.40%、磷0.38%的水平即可满足羔羊生长需求，加入过量的钙、磷，既浪费资源又污染环境。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究磷酸脲添加量对羔羊生长性能、屠宰性能和肉品质的影响，并对磷酸脲在肉羊生产中的安全使用剂量进行评价。试验选用80只杜寒杂交F1代平均体重（25.86±1.06） kg的公羔羊，随机分为5组，每组8个重复，每个重复2只，在精粗比为1:1的饲粮中分别以0（对照）、0.5%、1%、2%、4%的磷酸脲替代部分豆粕类饲料。预试期为12 d，正试期为60 d。结果表明：1%组的羔羊在各时期平均日增重、宰前活重、胴体重、屠宰率均达到最高值；4%组的羔羊在各时期平均日增重、宰前活重、胴体重均极显著低于其他各组（P0.05）；2%组的黄度值显著高于其他各组（P<0.05）；在剪切力方面，1%组（5.16 kg/cm2）显著高于0.5%组（4.47 kg/cm2）、4%组（3.69 kg/cm2）和对照组（4.21 kg/cm2）（P<0.05）。结果提示：磷酸脲可以作为氮磷添加剂用于肉羊饲粮中。羔羊饲料中的磷酸脲添加量为1%时，羔羊达到最佳生长性能和屠宰性能；当磷酸脲替代比例达到4%时，极显著降低羔羊的平均日增重、胴体重，增加肌肉的亮度值；当磷酸脲替代比例为2%时，为有效安全水平，对羔羊生长性能、屠宰性能和肉品质除肌肉黄度值外无显著影响。因此，饲料中1%的磷酸脲添加量能够使羔羊达到最佳生长性能。
点击量
点击量
下载量
评论
