分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究白藜芦醇（RES）对氧化损伤小鼠睾丸间质细胞TM3的保护作用，并探索其可能的作用机制。首先，用不同浓度（0、150、200、250、300 μmol/L）的过氧化氢（H2O2）处理小鼠睾丸间质细胞TM3 8 h，确定建立氧化损伤细胞模型的适宜H2O2浓度。用适宜浓度的H2O2建立氧化损伤细胞模型；然后，用不同浓度（0、2.5、5.0和10.0 μmol/L）的RES分别处理正常细胞和氧化损伤细胞24 h，确定RES安全浓度；最后，用安全浓度的RES处理氧化损伤细胞24 h。在整个培养过程中采用iCELLigence实时无标记细胞功能分析仪监测细胞的增殖情况；待安全浓度的RES处理氧化损伤细胞结束后采用2',7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）探针法检测细胞中活性氧（ROS）的含量，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质印迹（Western blotting）法分别检测沉默调节蛋白1(SIRT1)/UCP2信号通路中关键因子SIRT1和UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量。结果表明：1）用浓度为150 μmol/L及以上的H2O2处理细胞8 h后，极显著降低细胞存活率（P0.05）；用2.5、5.0和10.0 μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后，细胞存活率均显著提高（P0.05）。因此，选用5.0 μmol/L为RES的安全浓度。3）用5.0 μmol/L的RES处理氧化损伤细胞24 h后，细胞中ROS的含量较极显著降低（P<0.01）；细胞中SIRT1 mRNA和蛋白质的相对表达量极显著增加（P<0.01），而UCP2 mRNA和蛋白质的相对表达量则显著或极显著降低（P<0.01或P<0.05）。由此可见，适宜浓度的RES可激活SIRT1同时抑制UCP2的表达，UCP2通过负反馈调节方式减少细胞内ROS的生成，从而在一定程度上抑制TM3细胞的氧化损伤。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-20 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究抗菌肽Sublancin灌胃对卵清白蛋白（OVA）免疫小鼠获得性免疫反应的影响。试验选用6周龄雌性BALA/c小鼠60只，随机分为5个组，每组12只小鼠。空白对照组小鼠灌胃生理盐水，阳性对照组小鼠灌胃2.5 mg/kg体重的左旋咪唑溶液，抗菌肽Sublancin组小鼠灌胃0.5、1.0和2.0 mg/kg体重的抗菌肽Sublancin溶液。各组小鼠连续灌胃14 d。在灌胃结束24 h后用模式抗原OVA皮下注射对各组小鼠进行免疫，14 d后加强免疫1次，第2次免疫7 d后采血和取脾脏，用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）法对血清OVA特异性免疫球蛋白G（IgG）及其亚类IgG1、IgG2a和细胞因子含量进行检测。结果表明：1）与空白对照组相比，0.5、1.0和2.0 mg/kg抗菌肽Sublancin组和阳性对照组小鼠血清OVA特异性IgG含量均显著或极显著提高（P0.05）。本试验结果表明，抗菌肽Sublancin可以诱导OVA免疫小鼠产生Th1和Th2混合型免疫反应，增强其体液免疫和细胞免疫功能。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 不断发展的微藻产业需要统一可信的生物质检测方法体系来评估微藻研究、培养及生产中的各种生物质指标。本文对目前常用的微藻生物质组成的检测方法进行综述及评估，以期推动微藻产业的生物质分析平台标准化。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-07-24 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶，广泛应用于诸多领域。本研究选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1，以α-factor为参照，分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶ManA，选择适合DSB和ManA表达的信号肽以提高胞外酶活水平。结果表明不同信号肽引导的两种半纤维素酶的酶活水平相差较大：对DSB（分子量为23 KDa），α-factor介导的表达效率明显优于其它3种信号肽；但对ManA（分子量为30 KDa），Dse4和α-factor介导的表达效率相当且明显优于Scw11和Exg1。因此在X33中表达DSB时应选用α-factor，而表达ManA时应选用Dse4或α-factor。此外胞内酶活的结果显示α-factor介导的DSB和ManA重组菌胞内滞留酶活明显高于其它信号肽，而分子量为30 KDa的ManA的滞留酶活又明显高于分子量为23 KDa的DSB，因此在表达ManA蛋白时，选用其它的信号肽，如Dse4，会减少外源蛋白在胞内的滞留从而在一定程度上提高外源蛋白的分泌量。本研究为毕赤酵母表达系统鉴定更多可用的信号肽并筛选到针对目的蛋白的最优信号肽奠定了一定的基础。
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