分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-05-16 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 细胞穿膜肽（Cell-penetrating peptide,CPP）作为一种体内大分子药物跨膜运输载体被广泛研究和应用。中期因子Midkine（MK）是人体的一种带有肝素结合域（Heparin-Binding Domain，HBD）的生长因子。本文报道了MK中HBD的部分富含碱性氨基酸的基因序列（命名为MK-S0）与绿色荧光蛋白（EGFP）基因融合表达后，能将EGFP有效地转运入胞内，且其穿膜转运效率高于经典穿膜肽Tat。将MK-S0序列进行进一步突变优化改造得到的MK-∆4，其穿膜效率比天然序列来源的MK-S0提高16倍以上，且MK-∆4的穿膜转运作用适用于多种肿瘤细胞。穿膜机理分析研究结果显示，MK-∆4可与细胞表面硫酸乙酰肝素结合，随之以巨胞饮形式内吞入胞。采用MTT方法检测的细胞生长抑制试验结果显示，连接有MK-∆4的苦瓜来源的核糖体失活蛋白MAP30比单独的MAP30对HeLa肿瘤细胞的IC50值降低5.8倍，大大提高了这种药物蛋白抑杀肿瘤细胞的效果。由此表明，源于MK的这种经过突变改造的MK-∆4，可作为一种新型高效的细胞穿膜肽，将药物蛋白有效运输到细胞内发挥抗肿瘤效应。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究饲粮中添加谷氨酰胺（Gln）对断奶仔猪不同阶段生长性能的影响，以及其对脂多糖（LPS）诱导肠道损伤后断奶仔猪血清生化指标和生长性能的影响。选用24头28日龄健康的“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪，随机分为3组，每组8个重复，每个重复1头猪。对照组和LPS组饲喂基础饲粮，Gln+LPS组饲喂添加了1%的外源性Gln的基础饲粮；在试验第22、25、28、30天，LPS组和Gln+LPS组腹腔注射100 μg/kg BW LPS，对照组则注射相同剂量的生理盐水。试验期30 d。结果表明：1）LPS处理前（试验第1~21天），与对照组相比，Gln+LPS组显著提高了试验第1~7天断奶仔猪的平均日采食量（ADFI）和平均日增重(ADG)（P0.05）。3）LPS组断奶仔猪的小肠长度显著低于对照组和Gln+LPS组（P0.05）。4）与对照组相比，Gln+LPS组断奶仔猪的血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）含量和碱性磷酸酶（ALP）活性显著降低（P0.05）；Gln+LPS组和LPS组断奶仔猪的血清免疫球蛋白M（IgM）含量显著提高（P<0.05）。由此可见，饲粮中添加1%的Gln能够显著提高仔猪断奶后第1~7天的生长性能，之后效果不明显。饲粮中添加1%的Gln能够调节应激仔猪的血清生化指标，改善其生长性能和小肠长度，从而缓解仔猪断奶应激。
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