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Your conditions: 王云龙(3)

1. chinaXiv:202006.00112 [pdf]

正常人尿液蛋白质组非限制修饰鉴定与比较:多位点氧化修饰是不同年龄段人群的尿蛋白修饰特点

刘永涛; 潘宣圳; 华元瑞; 王云龙; 高友鹤
Subjects: Biology >> Biochemistry

健康人尿液中的蛋白质含量虽较低,但种类却十分丰富,尿蛋白质组所蕴含信息能够展现机体生理与病理早期阶段时的细微差别。蛋白质的化学修饰是指其氨基酸残基或其链末端上参与的共价基团反应,进而使其分子的结构、执行的调控和信息传递的功能得到改变,因此,对尿液蛋白质化学修饰水平的比较与研究同样有重要意义。本研究拟以不同年龄段健康人群的尿液(儿童22例,年轻人10例,老年人6例)为研究对象,通过高分辨串联质谱及非标记定量的蛋白质组学分析方法,结合非限制性修饰鉴定算法整体比较三种类型样品之间的蛋白质化学修饰差异水平。结果表明,涉及多种氨基酸残基的氧化修饰是老年人与青少年尿液蛋白质样品之间的主要差异,且修饰影响了众多蛋白质的生物过程。本研究首次利用非限制性修饰鉴定算法研究了不同年龄段人群的尿液在整体蛋白质组修饰上的差异,并指出了氧化修饰是区分青少年和老年人尿液蛋白质的主要修饰类型。

submitted time 2020-06-15 Hits5723Downloads524 Comment 0

2. chinaXiv:201707.00685 [pdf]

Thymidine Kinase 1 (TK1) 重组蛋白的表达、纯化及鉴定

王云龙; 赵二霞; 李玉林
Subjects: Biology >> Bioengineering

为获得具有免疫原性的TK1重组蛋白。通过构建能够表达TK1蛋白的重组菌BL21-pET32a-TK1,采用大肠杆菌pET32a表达系统,优化IPTG浓度、诱导温度、诱导时间使BL21-pET32a-TK1重组菌表达目的蛋白的作用条件最佳。表达产物用镍离子亲和层析纯化获得TK1蛋白,并用SDS-PAGE和western blot进行检测。用TK1重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体,检测蛋白免疫原性。实验结果表明:成功构建能够表达TK1蛋白的重组菌BL21-pET32a-TK1,在37℃条件下,IPTG浓度为0.2mM/L、诱导6h时重组蛋白TK1表达量最高。镍离子亲和层析梯度洗脱在80mM咪唑条件下TK1蛋白纯度最大,灰度分析为87.3%,浓缩后蛋白浓度为5.96mg/ml。用该蛋白制备杂交瘤共获得10株稳定分泌TK1抗体的阳性单克隆细胞株,表明TK1重组蛋白具有较好的免疫原性。本实验成功获得可溶性、抗原活性高、免疫原性强的TK1重组蛋白,为肿瘤科学及临床应用研究提供物质支撑。

submitted time 2017-07-24 From cooperative journals:《中国生物工程杂志》 Hits605Downloads381 Comment 0

3. chinaXiv:201703.00429 [pdf]

江苏海门蛎岈山牡蛎礁恢复工程的生态评估

全为民; 冯美; 周振兴; 吴祖立; 唐峰华; 王云龙; 包小松; 沈辉; 成伟
Subjects: Biology >> Ecology

江苏海门蛎岈山牡蛎礁是我国目前现存的面积最大的潮间带活体牡蛎礁,但由于人类活动干扰及泥沙淤积等原因,该自然牡蛎礁面积不断缩小,影响着该牡蛎礁的生态功能与保护管理。于2013-2014年开展了首期江苏海门蛎岈山牡蛎礁恢复工程,基于生态监测结果评估该牡蛎礁恢复工程的生态效果。多层礁体上活体牡蛎丰度显著高于单层礁体(P < 0.05);随着礁体的发育,恢复礁体上牡蛎丰度显著下降(P< 0.05)。非参数Kruskal-Wallis检验结果显示,在两个生活周期内(2013-09-2013-11,2014-03-2014-05)牡蛎均呈现快递的生长(Q=10.519,Q=6.527,P< 0.05),而在越冬期内(2013-11-2014-03)牡蛎几乎停止了生长(Q=0.35,P > 0.05)。随着礁体的发育,恢复牡蛎礁上大型底栖动物群落的物种丰度并没有增加,但其平均总密度和总生物量均呈现显著性的增长(P < 0.05);礁体构建后1a时恢复牡蛎礁中大型底栖动物的平均总密度和生物量均接近于自然牡蛎礁(P > 0.05),但显著高于未恢复区(P < 0.05);恢复牡蛎礁与自然牡蛎礁具有显著不同的大型底栖动物群落(ANOSIM,P=0.001)。研究结果表明该牡蛎礁恢复工程取得初步成功。

submitted time 2017-03-22 From cooperative journals:《生态学报》 Hits1790Downloads754 Comment 0

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