下调Fsp27基因表达联合杨梅素干预对3T3-L1细胞脂解的影响

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-09-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

董维鹏 张少华 许祥 燕炯

摘要： 目的：下调脂肪特异性蛋白27（Fsp27）基因表达联合杨梅素干预，观察对3T3-L1细胞中脂质代谢的影响，并探究脂滴发生、发展变化的调控机制。方法：常规培养3T3-L1前脂肪细胞，采用“鸡尾酒”法诱导其分化为成熟脂肪细胞。脂质体法转染sh-Fsp27干扰载体，以杨梅素浓度为100 μmol/L的完全培养基干预成熟脂肪细胞72 h。油红O染色，观察脂滴形态及大小的变化；酶法测定细胞内甘油及甘油三酯的含量，观察细胞脂质代谢的变化。Western blot检测Fsp27、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（HSL）、甘油三酯脂肪酶（ATGL）以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路蛋白的表达。结果：1. 3T3-L1细胞诱导分化后，形态由纤维样变成圆形，并伴随有细胞体积的增大。2. 与对照组相比，杨梅素组和转染组细胞中甘油三酯含量下降，甘油含量升高（P<0.05）。与其他三组相比，联合干预组细胞中甘油三酯含量减少，甘油含量增加（P<0.05）。3. 与对照组相比，其余三组细胞内Fsp27蛋白的表达量均降低，ATGL和PPARγ的表达量升高（P<0.05）。另外，联合干预组和杨梅素组细胞内HSL的表达量和p-p38MAPK/ p38MAPK的比值均大于sh-Fsp27组和对照组（P<0.05）。结论：1. Fsp27基因沉默与杨梅素联合干预可以更大程度地促进脂肪分解代谢。2.杨梅素可通过激活MAPK信号通路，上调HSL和ATGL的蛋白表达来发挥其促脂解的作用；sh-Fsp27干扰载体通过调节PPARγ和Fsp27蛋白的表达，增加ATGL含量来加速脂肪分解。

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