分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：热带假丝酵母以油脂为底物发酵时会产生副产物甘油，本研究对热带假丝酵母gk基因进行过表达，将副产物甘油转化为能量，提高油脂转化利用效率。方法：本研究以热带假丝酵母Candida tropicalis 1798中的甘油激酶（gk）为研究对象，利用PCR技术获得同源臂基因gkpR，通过一步法无缝克隆将同源臂和G418抗性基因(kanr)连接至pPICzαA载体，同时将解脂假丝酵母Candida lipolytica 1457中的启动子基因pGAP无缝连接至载体中的gkpR，构成质粒pPICzαA-gkp，并电转化至C.tropicalis 1798感受态细胞中，通过一次同源单交换，将启动子pGK替换为pGAP。结果：经过G418抗性筛选和PCR鉴定，成功获得pGAP基因替换菌株C. tropicalis 1798-gkPr；发酵验证结果显示，启动子基因替换C. tropicalis 1798在以甘油为底物培养时重组菌OD600 值比野生型菌株高46.4%，重组菌培养基中甘油剩余量比野生菌降低56.1%，表明启动子替换能促进C. tropicalis 1798对甘油吸收利用。此外，以油脂为底物进行发酵实验时还发现重组菌产长链二元酸的量比野生菌提高32.7%。结论：通过启动子替换手段构建的重组菌C. tropicalis 1798-gkPr，提高了热带假丝酵母对于油脂组分中甘油成分的利用效率。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 目的：热带假丝酵母以油脂为底物发酵时会产生副产物甘油，本研究对热带假丝酵母gk基因进行过表达，将副产物甘油转化为能量，提高油脂转化利用效率。方法：本研究以热带假丝酵母Candida tropicalis 1798中的甘油激酶（gk）为研究对象，利用PCR技术获得同源臂基因gkpR，通过一步法无缝克隆将同源臂和G418抗性基因(kanr)连接至pPICzαA载体，同时将解脂假丝酵母Candida lipolytica 1457中的启动子基因pGAP无缝连接至载体中的gkpR，构成质粒pPICzαA-gkp，并电转化至C.tropicalis 1798感受态细胞中，通过一次同源单交换，将启动子pGK替换为pGAP。结果：经过G418抗性筛选和PCR鉴定，成功获得pGAP基因替换菌株C. tropicalis 1798-gkPr；发酵验证结果显示，启动子基因替换C. tropicalis 1798在以甘油为底物培养时重组菌OD600 值比野生型菌株高46.4%，重组菌培养基中甘油剩余量比野生菌降低56.1%，表明启动子替换能促进C. tropicalis 1798对甘油吸收利用。此外，以油脂为底物进行发酵实验时还发现重组菌产长链二元酸的量比野生菌提高32.7%。结论：通过启动子替换手段构建的重组菌C. tropicalis 1798-gkPr，提高了热带假丝酵母对于油脂组分中甘油成分的利用效率。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在探讨母猪妊娠末期背膘厚度对产仔性能和胎盘脂质氧化代谢的影响，以探索母猪妊娠期脂肪沉积与繁殖性能的关系。本试验度量了846头经产大白母猪妊娠第109天时的背膘厚度，并分为3组，背膘厚度≤18 mm的为第1组(母猪192头)，背膘厚度为19~22 mm的为第2组(母猪265头)、背膘厚度≥23 mm的为第3组(母猪389头)。记录母猪分娩后的产仔性能，测定胎盘组织中脂质、氧化产物水平及抗氧化酶活性。结果表明：1)尽管母猪妊娠末期背膘厚度对窝产仔数、产活仔数及木乃伊数无显著影响(P>0.05)，但显著影响了死胎数、初生窝重、初生头重和胎盘效率(P0.05)。值得注意的是，母猪妊娠末期背膘厚度显著影响每窝初生重≤0.9 kg的仔猪数和每窝初生重≤1.0 kg的仔猪数(P<0.05)，第3组的每窝初生重≤0.9 kg的仔猪数和每窝初生重≤1.0 kg的仔猪数均显著高于其他2组(P<0.05)。2)在第3组的胎盘组织中，不仅甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及游离脂肪酸(Free fatty acid, FFA)的水平显著高于其他2组(P<0.05)，而且丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)水平也显著高于其他2组(P<0.05)，同时超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于其他2组(P<0.05)。3)妊娠末期母猪胎盘组织中ROS水平与总产仔数、初生窝重及胎盘效率呈显著负相关(P<0.05)，而MDA水平与窝产仔数呈显著负相关(P<0.05)。由此可知，母猪妊娠末期背膘厚度与产仔性能密切相关。妊娠末期维持背膘厚度在19~22 mm，母猪可获得较高的产仔性能；背膘厚度≤18 mm时，会增加死胎数；而背膘厚度≥23 mm时，会引起胎盘组织中脂质过度沉积，从而加剧胎盘氧化应激的发生。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本文旨在应用Meta分析方法研究10～25 kg仔猪赖氨酸（Lys）需要量及其影响因素。本研究检索了1990年至2016年期间发表的有关仔猪Lys需要量的研究，根据文献筛选标准共17篇文献被纳入研究。用二次曲线（QC）模型、线性平台（LP）模型和曲线平台（CLP）模型估计了标准回肠可消化赖氨酸（SID Lys）需要量。结果表明：LP模型估计得到的SID Lys需要量较低，而QC和CLP模型的估计值较高且基本一致。其中，饲粮SID Lys含量变化不影响仔猪的平均日采食量（ADFI）（PQC=0.828 0，Plinear=0.584 4）；以平均日增重（ADG）和料重比（F/G）为因变量，SID Lys含量为自变量，用QC模型估计得出10～25 kg仔猪饲粮SID Lys需要量分别为1.280%（P<0.000 1）和1.260%（P<0.000 1）。饲粮类型以及遗传背景等因素影响SID Lys需要量。其中，玉米豆粕饲粮和非玉米豆粕饲粮的SID Lys需要量分别为1.307%（P=0.005 0）和1.138%（P=0.000 1）；中国地方猪种和瘦肉型猪种的SID Lys需要量分别为1.060%（P=0.001 2）和1.334%（P=0.004 3）。综上，为满足10～25 kg仔猪达到最佳生长性能，饲粮SID Lys需要量为1.230%～1.280%，同时应考虑饲粮类型以及猪的遗传背景等因素。
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