分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在探究一种猪胃肠道内容物与粪便微生物梯度分离方法。试验首先用分离缓冲液对猪胃肠道内容物及粪便样品进行稀释，寻找最佳稀释比例，再进行梯度离心得到胃肠道内容物及粪便样品中的微生物菌体。本方法得到胃、空肠和回肠内容物样品与分离缓冲液的最佳稀释比例范围为8.0%~12.0%，样品的称取量范围为3.2~4.8 g；盲肠、结肠内容物及粪便样品与分离缓冲液的最佳稀释比例范围为2.0%~4.0%，样品的称取量范围为0.8~1.6 g。对饲喂3种饲粮蛋白质水平（12.0%、15.0%和18.0%）的30 kg猪胃肠道内容物与粪便微生物进行分离，并对其回肠内容物和粪便中微生物氨基酸组成以及胃肠道内容物与粪便中微生物多样性进行检测。结果显示：回肠内容物和粪便中微生物菌体大部分氨基酸对饲粮不同蛋白质水平的营养模式响应效果显著（P<0.05），胃肠道内容物与粪便样品微生物的聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）条带丰富和清晰。试验结果表明，该方法分离程度高，获取菌体干重多，同时还具有成本低廉、操作简单、重复性好等特点，可为更深层次的研究肠道微生物的生理功能提供方法。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究益生菌大肠杆菌Nissle 1917（EcN）抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果。采用体外法对EcN进行生长曲线绘制和耐酸、耐胆盐、耐热性能的测定；以猪肠上皮细胞IPEC-J2细胞为体外细胞模型，考察了EcN对该细胞的黏附率以及对致病菌大肠杆菌K88的黏附抑制率；同时通过蛋白质印迹法检测了EcN对IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4的水平的影响。结果表明：1）EcN对高酸、高胆盐和高温环境具有一定耐受能力。2）EcN对IPEC-J2细胞的黏附作用以对数期最佳，黏附率达33.96%，显著高于迟缓期、稳定期和衰亡期（P<0.05）。3）EcN对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制效果，黏附抑制率达87.84%。4）EcN还能上调IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4水平。结果提示，益生菌EcN具有较好的抗逆性能，能够良好地黏附猪肠上皮细胞，对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制作用。
点击量
点击量
下载量
评论
