ARTP辐照对磷脂酶A1重组质粒的诱变效应

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-06-01 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

杨建伟 薛正莲 朱昊 杨蒙 王洲

摘要： 利用常压室温等离子体诱变技术（ARTP）处理磷脂酶A1重组质粒pET28a-plaB，经琼脂糖凝胶电泳检测发现随着处理时间的延长，质粒超螺旋结构逐渐转变为开环及线性结构。对处理后的质粒转化到BL21宿主菌中，在特定选择培养基中检出突变株转化子，结果表明，质粒处理时间与转化率成反比，与突变率成正比，在60 S达到最优诱变值。挑选圈径比较大的转化子测定其酶活，结果显示突变株(12)最高酶活为12.8 U/mL，与原始菌株(CK)4.8 U/mL相比，提高了2.67倍。对两菌株测序比对，发现碱基突变率为0.74 %，且大都集中在A→G和C→T。ARTP对离体质粒具有较好的诱变效应。

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