分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-25 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳糖合成相关基因表达的影响，深入探讨Lys对乳糖合成的影响机理。将第3代BMECs随机分为6个组，每组6个重复，各组细胞培养液中Lys的添加浓度分别为0.5（对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，细胞在37 ℃、5% CO2条件下培养48 h。结果表明：适宜浓度Lys对乳糖含量和葡萄糖转运载体蛋白1（GLUT1）、已糖激酶I（HKI）和已糖激酶II（HKⅡ）基因表达量的影响呈显著的剂量依赖关系（P<0.05）；方差分析结果显示，添加Lys显著或趋于显著影响乳糖含量及乳糖合成相关基因表达。与对照组相比，2.0~16.0 mmol/L组乳糖含量较高（P=0.055），4.0~16.0 mmol/L组GLUT1基因表达量显著升高（P<0.001），2.0~8.0 mmol/L组α-乳清白蛋白（LALBA）和β-1,4-半乳糖基转移酶-1（β-4GALT1）基因表达量显著升高（P=0.006和P<0.001），8.0~16.0 mmol/L组HKⅡ基因表达量显著升高（P<0.001）；但1.0~2.0 mmol/L组HKⅡ基因表达量显著下降（P<0.001），4.0~16.0 mmol/L组HKI基因表达量下降，尤以16.0 mmol/L Lys显著低于对照组（P=0.002）。综上所述，Lys对乳糖含量和GLUT1、HKI和HKⅡ基因表达量的影响存在显著的剂量依赖，Lys浓度为2.0~8.0 mmol/L时，对BMECs内乳糖合成促进效果较好。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2018-12-24 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳蛋白合成相关基因表达和蛋白磷酸化的影响，深入探讨Lys对乳蛋白合成影响的机理。将第3代BMECs随机分为6组，各组Lys的浓度分别为0.5（对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，每组6个重复。37 ℃、5% CO2培养48 h，之后采用化学发光法测定BMECs内三磷酸腺苷（ATP）的含量，采用实时荧光定量PCR法测定乳蛋白合成相关基因表达量以及采用蛋白质免疫印迹法测定乳蛋白合成相关蛋白的磷酸化水平。结果表明：随着Lys浓度的增加，ATP含量呈趋于显著的二次曲线升高（P=0.050）;κ-酪蛋白（CSN3）（P=0.093）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）（P=0.005）、真核起始因子4E（eIF4E）（P=0.076）和磷酸腺苷活化的蛋白激酶α1（AMPKα1）基因表达量（P=0.045）呈显著或趋于显著的二次曲线变化，均为先升高后降低；α-酪蛋白（CSN1S1）基因表达量（P=0.081）及mTOR（P=0.038）和p70核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）磷酸化水平（P=0.022）呈显著或趋于显著的一次线性降低；磷酸腺苷活化的蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平呈显著的一次线性升高（P=0.014）。方差分析结果显示，添加Lys显著影响ATP含量、乳蛋白合成相关基因表达量及eIF4E磷酸化水平（P<0.05），其中，ATP含量以2.0~16.0 mmol/L组，CSN1S1、β-酪蛋白（CSN2）、信号转导和转录激活因子5（STAT5）以1.0~2.0 mmol/L组，mTOR基因表达量以1.0~8.0 mmol/L组，CSN3基因表达量以1.0~4.0 mmol/L组，酪氨酸激酶2（JAK2）基因表达量以1.0~16.0 mmol/L组，S6K1基因表达量以2.0 mmol/L组，eIF4E基因表达量以2.0~8.0 mmol/L组，eIF4E磷酸化水平以2.0~4.0 mmol/L组时促进效果较好，但16.0 mmol/L组CSN1S1、CSN3、STAT5及mTOR基因表达量受到抑制，1.0~16.0 mmol/L组真核起始因子4E结合蛋白1（4EBP1）基因表达量受到抑制。总之，Lys浓度为1.0~2.0 mmol/L时，对BMECs内乳蛋白合成相关基因表达的促进效果较好。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-23 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 乳蛋白前体物主要有游离氨基酸和小肽等。氨基酸不仅能影响乳腺内乳蛋白的合成，而且对乳脂的合成起一定的调控作用。本文主要阐述了氨基酸在乳脂合成过程中的调节作用，并从乳腺对乳脂前体物的摄取规律、乳脂合成相关基因表达、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白和腺苷酸活化蛋白激酶信号通路的角度综述了氨基酸对乳脂合成的可能机理，为进一步研究乳脂合成机理及改进牛奶营养品质提供理论依据。
分类： 生物学 >> 动物学 提交时间： 2017-10-10 合作期刊: 《动物营养学报》
摘要： 本试验旨在研究赖氨酸（Lys）对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）内乳脂肪合成相关基因和蛋白表达的影响，探讨Lys影响乳脂肪合成的机理。将第3代BMECs随机分为6组，每组6个重复,每个重复1个培养孔。各组培养基中Lys的浓度分别为0.5（基础培养基，对照）、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 mmol/L，37 ℃、5% CO2培养48 h后测定BMECs甘油三酯（TAG）含量、乳脂肪合成相关基因和蛋白的表达量。结果表明：BMECs内TAG含量（P=0.013）以及脂肪酸结合蛋白3（FABP3，P=0.001）、脂蛋白脂酶（LPL，P=0.096）、脂肪酸合成酶（FASN，P=0.003）、乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6（AGPAT6，P=0.038）和甘油-3-磷酸酰基转移酶（GPAM，P=0.022）基因表达量对Lys呈显著或趋于显著的浓度依赖效应。FABP3基因表达量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组和LPL基因表达量以1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组显著高于0.5 mmol/L组（P<0.05）；FASN基因表达量以2.0 mmol/L组最高，显著高于16.0 mmol/L组（P<0.05）；硬脂酰辅酶A去饱和酶1（SCD1）基因表达量以2.0、4.0 mmol/L组显著高于其他组（P<0.05）；磷脂酸磷酸酯酶1（LPIN1）、嗜乳脂蛋白亚家族1成员1（BTN1A1）和黄嘌呤脱氢酶（XDH）基因表达量均以1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L组显著高于0.5 mmol/L组（P<0.05）；过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）基因及蛋白表达量均以2.0、4.0 mmol/L组显著高于0.5和8.0、16.0 mmol/L组（P<0.05）；固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）基因表达量以1.0、2.0、4.0 mmol/L组显著高于其他组（P<0.05），蛋白表达量以1.0组显著高于其他组（P<0.05）。但高浓度Lys抑制AGPAT6和GPAM的基因表达，AGPAT6基因表达量以2.0、4.0、8.0、16.0 mmol/L组显著低于0.5、1.0 mmol/L组（P<0.05），GPAM基因表达量以16.0 mmol/L组显著低于0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L组（P<0.05）。可见，Lys对BMECs的乳脂肪合成具有显著的促进效果，但高浓度的Lys抑制了乳脂肪合成相关基因的表达。本试验条件下，培养基中Lys适宜浓度为2.0~4.0 mmol/L。
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