SFRP5抑制BMP9诱导人脐带间充质干细胞成骨分化的实验研究

分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-03-13 合作期刊: 《中国生物工程杂志》

郑妍 姚欢 杨珂

摘要： 目的：探讨脂肪因子分泌型卷曲相关蛋白(Secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)对骨形态发生蛋白9 （bone morphogenetic protein 9，BMP9）诱导人脐带间充质干细胞( human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells，hUC-MSCs)成骨分化的影响。方法：将人脐带间充质干细胞根据不同的处理因素分为4个组：对照组、BMP9组、BMP9+SFRP5组和SFRP5 组；分别在3、5和7天进行ALP活性读数，7天进行ALP染色，21天进行茜素红染色检测钙盐沉积以及油红O染色；收集不同组的细胞用于裸鼠皮下注射成骨模型的建立，4周后取出离体骨进行Micro-CT 扫描和分析，获取的标本进行HE、Masson染色、Alcian blue染色及油红O染色检测。Western blot检测成骨分化相关蛋白runx2和OPN的表达。结果：BMP9 组的ALP活性读数及染色结果和茜素红染色均较对照组增加，而BMP9+SFRP5组则较BMP9组降低；BMP9处理后出现少量脂滴，而BMP9+SFRP5组脂滴明显增加，SFRP5组脂滴最多；裸鼠皮下注射成骨模型的观察结果显示，对照组和SFRP5组没有形成肉眼可见的皮下包块，BMP9组和BMP9+SFRP5组能生成异位骨；4W后观测大体标本以及进行MicroCT检测发现BMP9+SFRP5组的骨密度值小于BMP9组（P＜0.05）。HE、Masson染色，Alcian blue染色结果显示，BMP9组的骨分化程度大于BMP9+SFRP5，油红O染色结果示BMP9+SFRP5组有较多的成脂分化;SFRP5能抑制BMP9诱导的Runx2、OPN的蛋白表达。结论：SFRP5抑制BMP9诱导的人脐带间充质干细胞成骨分化。

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